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实验四 果蔬中维生素Ｃ的提取工艺条件探究 一 实验目的 1.学习果蔬中维生素Ｃ的提取工艺的原理和方法 2.学习维生素Ｃ的紫外分光光度法分析 3.学习以正交实验法优化工艺条件的试验方法 4.学习超声波法在提取中的应用。 二 实验原理 维生素 C(简称 Vc)又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素，化学式为 C6H8O6维生素C 纯品为白色无臭结晶，熔点在190—192℃，易溶于水，微溶于丙酮，在乙醇中溶解度更低，不溶于油剂。结晶抗坏血酸在空气中稳定，但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化， 生成脱氢抗坏血酸；在碱性条件下易分解，见光加速分解；在弱酸条件中较稳定。维生素C 不仅具有广泛的生理功能，能防止坏血病、关节肿，促进外伤愈合，使机体增强抵抗能力。而且在食品工业上常用作抗氧化剂、酸味剂及强化剂。 超声提取是超声波对液体中固体物质作用时，产生空化效应，造成生物细胞壁及整个生物体的破裂，加速溶剂进入细胞。同时，超声波的振动作用强化了胞内物质的释放、扩散和溶解，使化学成分快速进入溶剂中，从而达到提取的目的。 三 仪器和试剂 1. 仪器 烧杯(100mL、500mL) 、量筒(10mL)、锥形瓶(150mL)、0.45μm微孔滤膜、50mL 比色管型紫外可见分光光度计、超声波清洗器、电子天平、榨汁机、真空抽滤机、高速离心机、 2. 试剂 Vc抗坏血酸、、1mol/LNaOH(A.R)、磷酸、2.0% ( W/ V )偏磷酸蒸馏水、冰西红柿 四 实验步骤样品的处理 将西红柿洗净、擦干称取具有代表性样品的可食部分放入榨汁机中榨汁料液比维生素Ｃ含量 W、超声时间30 min、2.0%偏磷酸、冰水混合条件下，过滤，高速离心分离，.2超声时间维生素Ｃ含量W、2.0%偏磷酸、料液比1∶ 1、冰水混合条件下分别在 5、10、20、30、60min 不同时间下过滤，高速离心分离，, 处理后的样品于阴凉处保存, 防止维生素分解。 2、果蔬样品吸光度的测定果蔬料液比样品吸光度的测定待测果蔬提取液 取料液比对维生素Ｃ含量待测果蔬提取液，放入中，用浸提剂2.0%稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，在最大吸收波长测定其吸光度.1.2 碱处理果蔬提取液 取料液比对维生素Ｃ含量待测果蔬提取液，放入中溶液摇匀静置后，加入浸提剂2.0%，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白，在最大吸收波长处测定其吸光度。果蔬样品吸光度的测定取对维生素Ｃ含量待测果蔬提取液，放入中　吸光度确定 待测果蔬提取液与碱处理果蔬提取液的吸光度之差即为果蔬样品吸光度。λ=240nm V维生素C标准溶液 /mL 0.5 1.0 1.5 2..0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 C/μｇ/ｍＬ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 吸光度A 0.126 0.214 0.301 0.399 0.471 0.559 0.650 0.747 0.821 0.900 标准曲线如图： 2、维生素Ｃ含量的计算 测得果蔬样品的吸光度后，依据标准曲线方程，即可计算出果蔬中维生素Ｃ的含量［ｍｇ/１００ｇ］ 单因素试验 料液比对维生素Ｃ含量的影 W、超声时间30 min、2.0%偏磷酸、冰水混合条件下 料液比 1:1 1:2 1:3 1: 4 1:5 超声功率/W 280 280 280 280 280 超声时间/min 30 30 30 30 30 样品的体积/mL 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 2%偏磷酸的体积/mL 3.0 6.0 9.0 12.0 15.0 待测果蔬提取吸光度A1 0.300 0.265 0.247 0.200 0.168 碱处理果蔬提取液液吸光度 A2 0.101 0.123 0.125 0.114 0.084 果蔬样品吸光度A 0.199 0.142 0.122 0.086 0.084 样品中Vc含量/100ug/mL 18.29 11.69 9.37 5.20 5.00 3.2超声时间对维生素Ｃ含量的影响W、2.0%偏磷酸、料液比1∶ 1、冰水混合条件下分别在 5、10、20、30、60min 不同时间下 料液比 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 超声功率/W 280 280 280 280 280 超声时间/min 5 10 20 30 40 样品的体积/mL 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 2%偏磷酸的体积/mL 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 待测果蔬提取吸光度A1 0.276 0.285 0.291 0.297 0.300 碱处理果蔬提取液液吸光度 A2 0.127 0.138 0.144 0.139 0.148 果蔬样品吸光度A 0.149 0.147 0.147 0.158 0.152 样品