核酸的合成PPT.ppt

在ATP供能下，U4、U5、U6参与; 释放U1和U4； U5识别两个外显子，U6、U2催化转酯反应，以套索的方式进行拼接。 108 mRNA_Splicing.mov 4.酶促拼接： 这种内含子剪接方式在某些tRNA中发现。 剪接需多种酶：核酸内切酶，环化核苷酸二酯酶，激酶，连接酶和磷酸酯酶。 剪接需要ATP。 过程 1.内切酶切开内含子，外显子1的3’端为2’,3’-环磷酸基，外显子2的5 ’端为-OH. 2.在ATP和激酶作用下,外显子2的5’–OH成5’–P;环磷酸二酯酶打开外显子1的3’端环磷酸基,产生3’–OH. 3.ATP活化连接酶形成AMP-E,连接酶将AMP与5’–P连接,再由3’–OH攻击取代AMP,形成3’,5’磷酸二酯键. 4、磷酸酶除去2’-磷酸. (五)真核生物中转录物的选择性拼接 不同位点的多聚腺苷酸化 选择性剪接模式 一个基因的转录产物在不同发育阶段、分化和生理状态下，通过不同的RNA加工，可产生多种产物。 不同加工模式使单个基因产生不同功能蛋白质，大鼠的一个RNA初级转录物经不同加工产生两种不同激素： 降钙素（Calcitonin）在甲状腺中 降钙素基因相关肽(Calcitonin-gene-related peptide CGRP）在脑中 鼠中降钙素基因转录子的加工 RNA编辑（RNA editing） 一种改变RNA编码序列的特殊加工方式。 即在RNA初级转录物核苷酸顺序的特定位点发生改变：插入或删去核苷酸。由此引起阅读框架的改变，一个mRNA前体的编辑产物可产生多种蛋白质。 RNA编辑（人apoB基因） apoB基因有29个外显子，2153位CAA是编码谷氨酸的密码子；在肝中，apoBmRNA经拼接后CAA出现在蛋白质的4563位，即apoB100。在肠道apoBmRNA经编辑,C脱氨成U, 结果使原mRNA上2153位谷氨酸密码子成为合成终止的UAA密码子. 向导RNA （guide RNA, gRNA ）： 原生动物及植物线粒体中RNA编辑所需的RNA序列；gRNA带有编辑区的序列信息，在RNA需编辑处，找到不与其配对处，加入碱基，介导编辑过程。 RNA编辑的意义 可纠正基因突变造成的损害； 增加了基因产物的多样性； 与生物发育、分化有关，是基因调控的一种方式； 使基因产物获得新的结构和功能，促进生物进化； 可能与学习记忆有关。 六、RNA复制（RNA指导的RNA合成） 在某些生物中，RNA还可以是遗传信息的携带者，并可通过复制合成与自身相同的RNA分子。有以下方式： 1、以病毒RNA为模板的RNA合成： RNA→RNA 在依赖于RNA的RNA聚合酶（RNA复制酶）催化下完成。如烟草花叶病毒 2、反转录病毒的RNA合成： RNA→DNA→RNA 如HIV 三、真核细胞的转录作用 特点： 1、其基因家族是多拷贝的基因重复组成，故一个基因上可同时进行多个转录过程，产生多条RNA链。 多起点转录 南非爪蟾的卵母细胞rRNA的合成 2、蛋白质编码基因多是不连续的，编码部分（外显子）被不编码基因（内含子）隔断。 3、真核生物的启动子： 三类聚合酶的启动子各有其结构特点： 1) RNA聚合酶II启动子：有三个保守区： TATA框(Hogness框)位于起始点上游25-30 bp 上游调控元件 (Upstream Regulatory Element，URE)包括：GC box和CAAT box 等。 2）RNA聚合酶Ⅰ启动子 由隔开约70bp的两个保守区域构成。 3）RNApol Ⅲ的启动子： 位于+55bp位置。 ( 腺病毒 ) 4.转录因子(transcription factor,TF)： 协助RNA聚合酶起始转录的一些辅助因子。由多种蛋白质组成，与启动子装配成复合物，协助RNA聚合酶结合，起始转录； 在RNApolⅡ启动子上作用的TF称为基本转录因子（basal transcription factor，TF Ⅱ)，功能有： 1）参与解旋、解链、ATP酶帮助组装起始复合物； 2）激酶活性使RNApol多位点磷酸化，促进转录； 3）参与DNA损伤切除修复； 4）参与延伸。 真核生物的转录过程 转录过程： 1、起始： 1）启动子：具-25的TATA框（TATA box）; 有些无TATA框，以看家基因 （housekeeping genes)起始转录。 2）转录因子(transcription factor Ⅱ ,TFⅡ)： 协助RNA聚合酶起始转录的一些辅助因子. 由多种蛋白质组成，与启动子 装配成复合物，协助聚