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生化工艺学第11章PPT
2.菌种退化的原因及防止 菌种退化的原因 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。 当控制产量的基因发生负突变,就会引起产量下降; 当控制孢子生成的基因发生负突变,则使菌种产孢子性能下降。 一般而言,菌种的退化是一个从量变到质变的逐步演变过程。开始时,在群体中只有个别细胞发生负突变,这时如不及时发现并采用有效措施而一味移种传代,就会造成群体中负突变个体的比例逐渐增高,最后占优势,从而使整个群体表现出严重的退化现象。 菌种退化的防止措施(1)防止基因突变(2)采用双重缺陷型(3)制定科学管理制度(4)分离单菌落(5)选择培养条件 菌种保藏目的 ??? 保持优良菌株的生产性能的稳定、不污染杂菌、不死亡。 菌种保藏的要求: 1、菌种不死亡; 2、菌种的原有特性不变 菌种保藏的原理 ??? 主要根据菌种的生理、生化特性,人工创造条件使菌体的代谢活动处于休眠状态。 3.常用的菌种保藏方法 (1)斜面保存法 将菌种转接到新鲜的琼脂斜面上,待生长良好后,于4℃保存。根据具体情况,间隔一定时间后转接。 (4℃保存,定期转接)(2)矿油法 在菌种斜面上覆盖矿物油以隔绝空气防止蒸发。如液体石蜡(3)索氏法 将小试管斜面的菌种放在大试管内,大试管内装几粒氢氧化钾,管口加橡皮套,然后用石蜡包封。 (套管+氢氧化钾+石蜡包封)(4)干硅胶法 试管内装硅胶约半满,180℃加热灭菌1.5小时,置密封干燥器内冷却,接种菌液约1ml,塞好棉花,放入预置有色硅胶的大瓶中,蜡封瓶口,于低温处保存。(5)砂土管法 取普通黄沙,洗净过60目筛,晒干,另取普通圆土研碎,过筛,晒干。两者以6:4混合。分装于安醅瓶或小试管中,然后在60℃干热灭菌2小时,连续灭菌三次后即可使用。装管时可吸取少许孢子悬浮液加入,待干燥后抽真空封口或用棉花塞紧后蜡封,低温保藏。(6)冷冻干燥法 将菌种悬浮于脱脂消毒牛奶中,快速冷冻,真空干燥。(7)甘油冷冻保存法 将对数期菌体悬浮于新鲜培养基中,加入15%消毒甘油,混匀速冻,冻存于-70~-80℃. 四、几种药用动物的采集与处理1.牛黄2.狗宝3.马宝4.骡宝5.猴枣6.鸡内金7.狗肾8.全蝎9.土鳖虫10.刺猬11.鳖甲12.穿山甲13.蜈蚣14.僵蚕15.蟾酥16.蛙干及蛙油 请思考后回答: 胱氨酸的提取工艺1操作步骤:(1)清洗(2)水解(3)中和 (4)提纯(5)精制干燥 利用了氨基酸的两性解离和等电点性质 1、胱氨酸的提取工艺1 ,分为哪些步骤,利用了 氨基酸的哪些理化性质? 请思考后回答: 取水解进行10h以上水解液2ml,放在一支试管中,然后加入10﹪NaOH溶液2ml。再滴加CuSO4溶液,摇匀后,如仍有明显天蓝色即表明水解已完全,如颜色变化则表明水解不完全,应继续水解。 2、胱氨酸提取分离中水解终点如何判定? 凡是体内不能合成,必须由饲粮供给,或能通过体内特定先体物形成,对机体正常机能和健康具有重要保护作用的脂肪酸称为必需脂肪酸(EFA)。因为人体可以合成最多一个不饱和键的脂肪酸,故必须脂肪酸含两个或多个不饱和键。 EPA为二十碳五烯酸,DHA为二十二碳六烯酸 3、试举例说明必需脂肪酸的含义? EPA、DHA又称为: 在生化产品的制备中,使用离子交换树脂有静态吸附和动态吸附两种方法。 被处理液与吸附剂搅拌混合,而被处理液没有自上而下流过吸附剂的流动,吸附剂和定量的溶液经过长时间的充分接触而达到平衡这种吸附操作叫静态吸附。 被处理液通过吸附剂自上向下流动的吸附叫动态吸附。 静态吸附比较简单,所以一般用静态吸附的方法选择对目标成分能够有效吸附的几种树脂,以缩小动态吸附的考察范围。而动态吸附主要是为了综合考察树脂的各种性能指标,比如说:流速、水洗量、洗脱剂用量、洗脱率等。 3、如何区分静态吸附与动态吸附? 第十一章 生化产品的保藏 复习思考题 1、简答生化产品保存的一般方法 2、简答蛋白质、核酸、油脂、生物材料和生物制剂的保存 3、简答动物细胞的培养要求与保存方法 作业: 谈谈实际生产中生化产品的保存方法,试举例说明。 第一节 生化产品保存的一般方法 一、密闭保存 二、低温保存 三、固态干燥保存 四、避光保存 五、添加稳定剂 第一节 生化产品保存的一般方法 生化产品大部分是药用,部分为生化试剂和食用品,保存方法大同小异。 ※主要有密闭保存、低温保存、固态干燥保存、避光保存、添加稳定剂等保存方法。 ◇生物材料的合理保藏对保证生化产品的质量和提高生产的经济效益有重要意义。生化产品的正确保藏,在生物化
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