生物化学 第10章、蛋白质的生物合成PPT.ppt

4、氨基酰-tRNA合成酶:活化氨基酸 5、GTP、ATP、Mg2+参加 第二节、蛋白质的合成过程 5个阶段： 氨基酸的活化——氨酰tRNA的合成 肽链合成的起始 肽链的延长 肽链合成的终止和释放 肽链合成后的加工处理 每种AA都有各自特异的氨酰-tRNA合成酶。 氨酰-tRNA合成酶具有高度的专一性，它既能识别特异的AA（L-构型），又能识别与该AA相对应的一个或多个tRNA分子； 氨酰-tRNA合成酶具有校正功能。可将错误掺入的AA从tRNA上水解下来。 一、氨基酸的活化——氨酰tRNA的合成 氨酰tRNA合成酶 氨酰tRNA合成酶 氨基酸+ATP+tRNA 氨基酰-tRNA +AMP +PPi 氨基酸活化(-COOH活化)过程中消耗了2个高能键 氨基酸的的羧基连接在tRNA 3’-CCA腺苷酸的3’-或2’-OH上。 反应1.2 反应3 SD序列：原核生物起始密码子AUG上游8~13nt处富含嘌呤的区断。 SD序列可与16S rRNA 3’上的一段序列互补配对。 SD序列的作用：使核糖体区别起始密码子AUG与肽链中Met的密码子，正确定位起始密码子，保证翻译的准确 1. 起始密码子的识别 二、肽链合成的起始 30S+50S+mRNA+fMet-tRNA [ 70S·mRNA·fMet-tRNAi ]+GDP+Pi IF1、IF2、IF3 GTP 2. 肽链合成的起始过程： IF1IF3·30S复合物 IF3·30S·mRNA复合物 IF3·30S·mRNA+IF2-GTP-fMet-tRNAi→ IF1·IF2·IF3·30S·mRNA·fMet-Trna(30S起始复合物） 30S起始复合物+50S大亚基→ mRNA·fMet-tRNA·70S（起始复合物） 原核生物的起始氨基酸：N-甲酰甲硫氨酸， 真核生物的起始氨基酸：甲硫氨酸 起始AUG由特定的起始tRNA（tRNAffMet）识别。 起始tRNA（ tRNAffMet ）与编码区内其它AUG的tRNA（ tRNAmMet ）均由同一种甲硫氨酰－ tRNA合成酶催化。 进位 ①进位：新的氨酰-tRNA进入A位（GTP供能） 2、肽链合成的延长(进位、成肽、移位) 转肽 转肽不需要能量的补给，ATP已储存在活化的tRNA上 ②转肽:23S rRNA的肽酰转移酶活性催化肽键形成 移位 ③移位(GTP供能) ：在EF-G作用下，核糖体从5’ → 3’ 沿mRNA移动，每次移动一个密码子。原处于A位点的肽链-tRNA从A位进入P位，空出A位再接受下一个氨酰-tRNA ；肽链的合成从N → C； 第十章、蛋白质的生物合成 Protein Biosynthesis 翻译：以mRNA为模板，按照mRNA分子上的三个连续核苷酸决定一种氨基酸的规则（三联体密码）合成具有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程，称为翻译。 第一节、蛋白质合成体系 1、 mRNA的功能： mRNA携带DNA的遗传信息，是蛋白质合成的模板。 4种碱基如何表示20种氨基酸呢？ RNA: UUAAGCAGC ？ DNA: AATTCGTCG 蛋白质： 一、mRNA与遗传密码 mRNA 5′ AUCGACCUGAGC 3′ 43=64 20 (√) mRNA 5′ AUCGACCUGAGC 3′ mRNA 5′ AUCGACCUGAGC 3′ 2、遗传密码的数学推算 20 (×) 4 42=16 20 (×) 1954年，Gamov推测遗传密码是三联体密码子（triplet codon） 1)体外翻译系统的建立 Ser-C14…. Leu-C14 …. Lys-C14 …. Gly-C14 …. 2)核酸的人工合成 In vitro Poly(U) poly(Phe) peptide Poly(C) poly(Pro) peptide Poly(A) poly(Lys) peptide Poly(G) ※??? 均聚核苷酸 可能的密码子 按计算可能出现的频率 氨基酸及其相对掺入量 UUU 100% Phe UUG,UGU,GUU 20% Cys(20%),Val(20) UGG, GUG,GGU 4% Gly(4%),Trp(5%) GGG 0.8% 随机共聚polyUG对氨基酸的编码（U:G=5:1） 随机共聚氨基酸 只能确定密码的组成，无法确定密码子的碱基顺序 3)核糖体结合技术 氨酰－tRNA－三核苷酸－核糖体复合物可被硝酸纤维