电压依赖型k^＋的通道在大鼠腺苷脑和脊髓镇痛及氟烷麻醉中的作用.doc

[标签:] 堂塑查生旦苤27鲞箜朔ChinJAnestheslol,April2007,Vol27,N0.4373 ? 疼痛诊疗与研究? 电压依赖型K通道在大鼠腺苷脑和脊髓镇痛及氟烷 麻醉中的作用 麻海春冯春生曾维安阎德大韩树海 腺苷作为一种内源性的抑制性神经递质在中枢神经系 统中直接或间接参与机体睡眠,镇静,痛阈调节和抗伤害作 用….有研究表明,脑和脊髓背角感觉神经元中存在大量的 腺苷受体,尤以A1受体为主.腺苷与其受体结合后通过 作用于细胞膜表面的G蛋白,激活ATP敏感型K’通道,使 神经细胞膜产生超极化,抑制神经元电兴奋的传导,从而产 生镇痛作用.但是电压依赖型K通道的激活是否参与腺 苷脑和脊髓水平麻醉和镇痛作用有待进一步探讨.本研究 拟观察电压依赖型K’通道在大鼠腺苷脑和脊髓镇痛及氟烷 麻醉中的作用,为临床研究提供参考. 材料与方法 动物选择,脑室及鞘内置管雄性SD大鼠(购自吉林大 学实验动物中心),年龄9—12周,体重300—350g.参照文 献[4]描述的方法进行第四脑室置管,腹腔注射戊巴比妥钠 50mg/kg麻醉大鼠后,将大鼠置于脑立体定位仪上,以前囱 中心为标准点,侧1.5rt’lrfl,后1.0rt’lrfl单侧置人24G不锈钢导 管,然后用2个螺丝钉和牙胶将其固定在颅骨上,保持导管 封闭,在给药期间打开.参照文献[4]描述的方法进行鞘内 置管,腹腔注射戊巴比妥钠50mS/ks麻醉大鼠后,将大鼠置 于固定仪上,在相当于枕骨大孔的位置中线切口,分离肌肉, 直到刺破硬膜见脑脊液溢出,将PE.10导管置人鞘内,深8.5 cm(相当于LI水平),导管的外端经皮下隧道固定在颈部. 置管后1周,选用无感染,无运动功能障碍的大鼠用于实验. 分组分为3个部分:第一部分为脑室内注药氟烷肺泡 最低有效浓度(MAC)测定实验,第二部分为脑室内注药甩尾 实验,第三部分为鞘内注药甩尾实验.每一部分将置管成功 的大鼠随机分为6组,生理盐水组,腺苷A.受体激动剂苯基 异丙基腺苷(R-PIA)0.8g组,R-PIA1.0ttg组,R-PIA2.0ttg 组,电压敏感型K通道阻滞剂4.氨基吡啶(4.AP)组及4.AP +R-PIA2.0ttg组. 脑室内注药氟烷MAC测定实验20只脑室置管成功的 大鼠(每只大鼠可5d使用1次)随机分成上述6组(n=7), 将大鼠在透明的容器内吸人氟烷麻醉后取出,气管内插入 基金项目:教育部留学回国人员科研启动基金资助项目 (2003170) 作者单位:130021长春市,吉林大学白求恩医学部附属第一医 院麻醉科(麻海春,冯春生,韩树海),本大学第二医院麻醉科(阎德 大);中山大学肿瘤防治中心麻醉科(曾维安) 16G导管,连接Rodentventilator683型呼吸机(Harvard Apparatus公司,日本)控制呼吸.吸人氧气(吸人氧浓度0.3 — 0.5)和氟烷(呼气末浓度1.0%1.5%),维持呼气末二氧 化碳分压35—40IDATIHg(1kPa=7.5toniHg),用电热垫给大鼠 加温,维持大鼠直肠温度在37.5左右.吸人氟烷15IIIin 后,4.AP组及4.AP+R.PIA2.0g组腹腔注射4.AP(批号: 207-987.9,Sigma公司,美国)2ms/kg,4.AP用生理盐水稀释到 2.0ml,其余各组给予等容量生理盐水,15min后用连接聚乙 烯导管的30G不锈钢针通过引导套管插入到第四脑室(尖 端超过引导套管1.0mm),用微量进样器分别注射相应剂量 R.PIA(批号:254.028.5,Sigma公司,美国)0.8,1.0,2.0g,上 述药物均用生理盐水稀释到5.0,生理盐水组和4.AP组给 予等容量生理盐水.于脑室给药后5min,参照文献[5]的方 法测定MAC.具体方法为:调整氟烷浓度至呼气末浓度稳 定10—15min后,用6寸止血钳扣到第一个齿,钳夹鼠尾的 中下113部位,大鼠有目的地挣扎或头,四肢的摆动为阳性 反应,否则为阴性反应,出现阳性反应时,呼气末氟烷浓度增 加0.1%,出现阴性反应时,呼气末氟烷浓度降低0.1%,直 至出现阳性反应,然后用出现阳性反应时呼气末氟烷浓度的 最高值与和出现阴性反应时呼气末氟烷浓度最低值的平均 值继续测试,出现阳性反应时氟烷呼气末浓度最高值与出现 阴性反应时氟烷呼气末浓度最低值的平均值即为MAC.用 M1025B红外线分析仪(HewlettPackard公司,美国)测定呼气 末氟烷浓度,每次测定前进行氟烷浓度标准化检测. 脑室内注药甩尾实验另取18只脑室置管成功的大鼠 (每只大鼠可5d使用1次)随机分成上述6组(n=5).腹腔 注射4.AP2mg/kg(用生理盐水稀释至2.0m1)或等容量生理 盐水后15min,脑室分别注射R-PI