第5章 微生物代谢调控PPT.ppt

二、代谢产物合成的调控 （一）发酵条件的控制 1、使用诱导物 诱导酶只有在诱导剂存在时才能形成，因此在培养基中加入诱导剂，可以大量合成该类酶。最好的诱导剂不是酶的底物，而是底物的衍生物。 不同发酵条件对谷氨酸产生菌代谢方向的影响 发酵条件 代谢方向 通气 乳酸或琥珀酸 谷氨酸 NH4+ α-酮戊二酸 谷氨酸 谷氨酰胺 pH 谷氨酰胺 谷氨酸 磷酸 缬氨酸 谷氨酸 2、控制细胞膜的渗透性 （1）. 通过生理学手段控制细胞膜渗透性 （2）. 通过细胞膜缺损突变控制细胞膜渗透性 生物素 谷氨酸 细胞膜渗透性 青霉素 谷氨酸 油酸缺陷型 油酸 （3）加入表面活性剂，将脂类从细胞壁中溶解：使细胞壁疏松，通透性增加 （4）控制Mn2+ 、Zn2+的浓度： 干扰细胞膜、细胞壁的合成。 3、添加前体绕过反馈控制点： D A B C E F 4、发酵与分离过程偶联 反馈调节的启动因素是超过菌体正常需求量的末端代谢产物。 在发酵的同时将末端代谢产物不断移走。 有膜分离、离子交换分离、萃取等 5、 培养基成分和浓度控制，解除分解代谢阻遏 葡萄糖的分解代谢阻遏次级代谢所需酶的合成，只有葡萄糖被消耗到一定浓度，分解代谢物水平降低，次级代谢物才开始大量合成。 方法： 采用混合碳源培养（速效和迟效）； 后期限量流加葡萄糖 1、应用营养缺陷型菌株解除反馈调节 （二）各种突变株的使用 谷氨酸棒杆菌的代谢调节与赖氨酸生产 E：表示反馈抑制；R：表示反馈阻遏 ? 2、抗代谢类似物突变株的使用 抗反馈调节突变株：对反馈抑制不敏感或对阻遏有抗性或兼而有之的菌株。 反馈抑制或阻遏或两者解除。 3、抗生素抗性突变株的应用 三、 定向发酵 （一）突变生物合成 采用一些诱变剂，如紫外线、γ-射线、激光、高速电子流或一些化学药物如亚硝基胍、溴化乙啶等对药物的产生菌进行诱变，使它们丧失合成某种中间体的能力，因而不能合成原来结构的化合物，成为阻断突变株。在发酵培养这些阻断突变株时添加某种天然或者化学合成的化合物作为中间体，这些突变株能利用这些中间体合成一些新结构的最终化合物，这个过程称为突变生物合成（mutation biosynthesis）。 ①营养缺陷型突变株，即由于编码菌体生长必需的某种酶的基因发生突变而使菌体不能生长，导致抗生素不能合成； ②独需型突变株，这种突变株菌体能正常生长，但由于编码抗生素的某一基因发生突变而丧失抗生素的合成能力； ③既是营养缺陷型又是独需型突变株，这种突变株的双重突变同时发生在编码菌体生长所必需的初级代谢及抗生素生物合成的次级代谢的两种基因上。 1 2 R1 R2 庆大霉素C1 CH3 NHCH3 C2 CH3 NH2 C1a H NH2 C2a C2的6-C差向异构体 C2b H NHCH3 卡罗糖基 2-DOS 绛红糖胺 氨基糖苷类抗生素结构改造 M. purpurea 2-羟基GM 特养型 5-脱氧GM 2-差向羟基GM M. inyoensis 突变霉素1 2-DOS-变株 突变霉素2 链霉胺 2，5双脱氧链霉胺 2差向链霉胺 链霉胺 * 第五节 发酵过程的代谢调控和代