第三章 原核微生物PPT.ppt

化学组成：含水率在90％～98％，多糖或多肽。 厚度：≥0.2mm荚膜，＜ 0.2mm 微荚膜。 形成条件：营养丰富、强的通气。 夹膜是分类特征之一 夹膜不易着色，可用负染色法染色。 1、夹膜（capsule） 负染色法又称衬托法 1.先染菌体。 2.再将背景染成黑色。 在菌体及背景的衬托下，二者之间会出现透明区，就是荚膜，在显微镜下清晰可见。 （1） 肽聚糖 以E.coli为典型代表，与G+细菌基本相同，差别在于： 四肽尾的第三个氨基酸分子是二氨基庚二酸（DAP） 没有特殊的肽桥，只形成较稀疏、机械强度较差的肽聚糖网套 2、G-细菌的细胞壁 M G L-Ala D-Glu DAP D-Ala M G L-Ala D-Glu DAP D-Ala 革兰阴性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 脂多糖LPS 磷脂 脂蛋白 （2）外膜 2、G-细菌的细胞壁 3、溶菌酶、青霉素对细菌细胞壁的作用 4、革兰氏染色 1884年，丹麦医生C.Gram发明 程序： （1）初染（草酸铵结晶紫1min） （2）媒染（碘液1min） （3）脱色（乙醇或丙酮） （4）复染（蕃红1min） 结果判断： 菌体呈紫色的为革兰氏阳性菌（G+） 菌体呈红色的为革兰氏阴性菌（G-） A B B B A B A A （1）初染（草酸铵结晶紫） 革兰氏染色程序和结果 A B B B A B A A 革兰氏染色程序和结果 （2）媒染剂（碘液30S） A B B B A B A A 革兰氏染色程序和结果 （3）脱色（乙醇） A B B B A B A A 革兰氏染色程序和结果 （4）复染（蕃红） A：革兰氏阳性细菌G+ B：革兰氏阴性细菌G﹣ 何为革兰氏染色的关键步骤？ 染色原理： 当用脱色剂处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。 G+细菌的细胞壁结构和组成特点，用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。 G-菌则不同，其细胞壁结构和组成特点，当脱色处理时，脂质被乙醇(或丙酮)溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。 5、缺壁细菌 缺壁 细菌 实验室 自发缺壁突变： L型细菌 自然界： 人工方法去壁 支原体 原生质体 球状体 L型细菌： 1935年时，在英国Lister预防医学研究所中发现一种由自发突变而形成细胞壁缺损的细菌——念珠状链杆菌，它的细胞膨大，对渗透压十分敏感，在固体培养基表面形成“油煎蛋”似的小菌落。由于李斯德(Lister)研究所的第一字母是“L”，故称L型细菌。许多G+ 菌和G- 菌都可形成L型。 专指实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。 原生质体（protoplast）：指在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后，所留下的仅由细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞，一般由G+菌形成； 球状体（sphaeroplast）：指还残留部分细胞壁的原生质体，一般由G- 菌形成 原生质体和球状体共有的特点： 无完整的细胞壁，细胞呈球状，对渗透压较敏感，即使有鞭毛也无法运动，对相应噬菌体不敏感，细胞不能分裂等。 意义： 杂交育种 遗传学基本原理研究 比较项目 G+ 细菌 G- 细菌 1、革兰氏染色反应 能阻留结晶紫而染成紫色 可经脱色而复染成红色 2、肽聚糖层 厚，层次多 薄，一般单层 3、磷壁酸 多数含有 无 4、外膜 无 有 5、脂多糖（LPS） 无 有 6、类脂和脂蛋白含量 低（仅抗酸性细菌含类脂） 高 7、鞭毛结构 基体上着生2个环 基体上着生4个环 8、产毒素 以外毒素为主 以内毒素为主 9、对机械力的抗性 强 弱 10、细胞壁抗溶菌酶 弱 强 11、对青霉素和磺胺 敏感 不敏感 12、对链霉素、氯霉素和四环素 不敏感 敏感 13、碱性染料的抑菌作用 强 弱 14、对阴离子去污剂 敏感 不敏感 15、对叠氮化钠 敏感 不敏感 16、对干燥 抗性强 抗性弱 17、产芽孢 有的产 不产 3.1 细 菌 1、细胞质膜： 又称细胞膜，是紧贴在细胞壁的内侧而包围细胞质的一层柔软、富有弹性的半渗透性薄膜。 二、原生质体（protoplasm） 化学组成： 蛋白质，60％～70％，种类多达200多种。 磷脂，30％～40％，（磷酸、甘油、脂肪酸和含胆碱） 多糖，约2％ 磷脂分子结构 细胞质膜的结构 磷脂双分子层结构 周边蛋白（integ