第五章 酶的非水相催化 to 学生PPT.ppt

第五章 非水相生物催化;酶的非水相催化体系;有机介质中的酶催化;3、胶束和反胶束体系：;反胶束;超临界流体介质中的酶催化体系;超临界流体的有关性质（P-V-T）;超临界酶催化的特点;离子液介质中的酶催化体系;非水相介质(有机相)中的酶学性质;1.非水相介质中酶的热力学稳定性;;2.非水相中酶的底物特异性（1/2）; 2.非水相中酶的底物特异性（2/2）;3.非水相酶的对映选择性（1/2）;3.非水相酶的对映选择性（2/2）;4.非水相酶的位置选择性;5.非水相酶的化学键选择性;pH值特性;6.PH记忆和PH忘记（1/2）;6.PH记忆和PH忘记（2/2）;酶都溶于水，只有在一定量的水存在的条件下，酶分子才能进行催化反应。所以酶在有机介质中进行催化反应时，水是不可缺少的成分之一。 有机介质中的水含量多少对酶的空间构象、酶的催化活性、酶的稳定性、酶的催化反应速度等都有密切关系，水还与酶催化作用的底物和反应产物的溶解度有关。 ;一个典型的非水相酶体系中水的含量仅占0.01%，水含量微小的差别会导致酶催化活性的较大改变。 酶需要少量的水保持活性的三维构象状态，水影响蛋白质结构的完整性，活性位点的极性和稳定性。 酶周围水的存在，能降低酶分子的极性氨基酸的相互作用，防止产生不正确的二级构象结构。;必需水;;必需水与酶分子的结构和性质有密切关系。不同的酶，所要求的必需水的量差别很大。如每分子凝乳蛋白酶５０分子必需水，每分子多酚氧化酶3.5×102。 因为必需水是维持酶分子结构中氢键、盐键等副键所必需的，而氢键和盐键又是酶空间结构的主要稳定因素。酶分子失去水，空间构象和催化能力受破坏。 有机介质中，通过必需水的调控，可调控酶的催化活性和选择性。;有机溶剂中的水分和水活度;有机相中含水量与酶活力;酶束缚水量;体系中水含量受各种因素的影响， 不同溶剂中酶活力对酶束缚水量的依赖是相似的，系统的含水量则变化很大。 为了排除溶剂对最适含水量的影响，Halling建议用反应系统的热力学活度来描述有机相中酶活力与水的关系。 利用水活度更能准确地描述有机介质反应体系中水和酶催化活性间的关系。水活度确定结合水的多少。;水活度的定义：系???中水的逸度与纯水逸度之比（水的逸度在理想条件下用水的蒸汽压代替） aw可以用体系中水的蒸汽压与同样条件下纯水的蒸汽压之比来表示 公式：aw=γw . xw=P/P0 xw :水的摩尔比； γw ：活度系数 ;一般情况下，最适水含量随着溶剂极性的增加而增加。同一种酶在不同有机溶剂中需水量不同，溶剂疏水性越强，需水量越少。 水活度有助于预测和研究相中酶活力与水的作用： 不控制水活度时，最佳水含量会随着溶剂的极性增加而增加 而溶剂的极性有己烷变成苯或戊醇时，最佳水活度几乎不变0.55。 说明：最佳水活度与溶剂的极性几乎无关。;;在不同有机溶剂中获得恒定的水活度非常重要，可分为下列三种方法： 1.用一个饱和盐水溶液分别预平衡底物溶液和酶制剂。 2.相反应体系中直接加入一种水合盐。 3.向每一溶剂中加入不同量的水。; 有机溶剂对酶催化活力的影响是非水催化酶学所要阐明的另一重要因素 溶剂不但直接或间接地影响酶的活力和稳定性,而且也能够改变酶的特异性通常有机溶剂通过与水、酶、底物和产物的相互作用来影响酶的这些性质.;1﹑有机溶剂对酶的结合水影响;2、有机溶剂对酶结构的影响;3.溶剂对底物产物的影响;溶剂能改变酶分子必需水层中底物或产物的浓度，而底物必须渗入必须水层，产物必须移出此水层，才能使反应进行下去。 底物→溶剂→必需水层→酶活性中心 产物→必需水层→溶剂 溶剂极性太小、疏水性太大、底物在溶剂中的溶解度大、浓度高，难于进入必需水层，活性中心结合底物浓度低、降低催化速度。 溶剂极性过大、亲水性太强、底物在溶剂中的溶解度低，降低催化速度。 适宜溶剂　２≤ lgP≤５ ;需掌握内容