第八章翻译PPT.ppt

8.2.3 肽链合成延长 根据mRNA密码序列的指导，顺序添加的氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 肽链延长在核糖体上连续性循环式进行，又称为核糖体循环(ribosomal cycle)，每次循环增加一个氨基酸，包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子 (elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EF-G 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位，促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 又称注册(registration) （一）进位 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核糖体A位。 需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子 通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物 P位tRNA上附着的肽链转移到A位上氨酰-tRNA上，这导致肽链的延伸，在此过程中核糖体停留在原位不动。 整个过程是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。 （二）成肽 8.1.3 tRNA结构与功能 反密码环 氨基酸臂 A C C 1 2 3 （一）tRNA的三级结构示意图 （二）tRNA的功能 1、解读mRNA的遗传信息 2、运输的工具，运载氨基酸 tRNA有两个关键部位： ● 3’端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA。 ●与mRNA结合部位—反密码子部位 tRNA分子的反密码环与mRNA上的密码配对。 tRNA的3’-末端-CCA-OH是氨基酸的结合位点。 由密码 — 反密码 - 氨基酸之间的“对号入座”，保证了从核酸到蛋白质信息传递的准确性。 3’ 5’ I CCA-OH 5’ 3’ CCA-OH G G C C C G tRNA凭借自身的反密码子与mRNA链上的密码子相识别，把所带氨基酸放到肽链的一定位置。 1、起始tRNA和延伸tRNA （三） tRNA的种类 能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA称起始tRNA，其他tRNA统称为延伸tRNA。 真核生物：起始密码子AUG 所编码的氨基酸是Met，起始AA-tRNA为Met-tRNAMet。 原核生物：起始密码子AUG 所编码的氨基酸并不是 甲硫氨酸本身, 而是甲酰甲硫氨酸，起始AA-tRNA为fMet-tRNAfMet 2、同工tRNA （三） tRNA的种类 代表同一种氨基酸的tRNA称为同工tRNA。 同工tRNA既要有不同的反密码子以识别该氨基酸的各种同义密码，又要有某种结构上的共同性，能被相同的氨基酰-tRNA合成酶识别。 3、校正tRNA （三） tRNA的种类 无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA），使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变就称为无义突变。 错义突变：由于结构基因中某个核甘酸的变化使一种氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子，这种基因突变叫错义突变。 GGA（甘氨酸） AGA（精氨酸） 8.2 蛋白质生物合成过程 氨基酰-tRNA复合物的形成 （氨基酸的活化） 翻译的起始 翻译的延伸 翻译的终止 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP＋PPi 氨基酰-tRNA合成酶 氨基酰-tRNA合成酶 (aminoacyl-tRNA synthetase) 8.2.1 氨基酸的活化 第一步反应 氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ PPi 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法：Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet tRNA与酶结合的模型 tRNA 氨基酰-tRNA合成