第六章 DNA损伤与修复PPT.ppt

RecA-P的三种功能 a、 DNA 重组活性 b、 与S.S. DNA结合活性 c、 proteinase活性 当DNA正常复制时 （无复制受阻，无DNA损伤， 无TT dimer） RecA-p不表现proteinase活性 当DNA复制受阻/ DNA damaged 细胞内原少量表达的RecA-p 与ssDNA结合 激活RecA-p的proteinase活性 修复损伤 LexA-p降解 RecA-p高效表达 SOS open 当DNA复制度过难关后 RecA-p很快消失 LexA gene on SOS off SOS 修复 DNA复制不很严格，新合成的DNA容易造成错误产生突变。 常见的DNA损伤及其修复机制 DNA损伤因素 DNA损伤类型 修复机制 X射线、氧自由基、烷化剂　 　 自发脱碱基 单链断裂、无碱基位点、氧化性碱基（如8-氧鸟嘌呤）尿嘧啶 碱基切除修复 紫外线和多环芳烃 环丁烷嘧啶二聚体等大的紫外线光产物和稳定的多环芳烃化合物等大分子DNA加合物 核苷酸切除修复 抗癌药（如顺铂和丝裂霉素） 双链断裂和链间交联 双链断裂修复（同源重组修复和末端连接） 复制错误和烷化剂 碱基错配和缺失（插入） 错配修复 七、 线粒体DNA损伤和修复 哺乳动物的每个细胞中含有2—100 个线粒体，每个线粒体有5—13 mtDNA 分子，mtDNA 只占细胞中DNA 总量的10%。人mtDNA 是独立于细胞核染色体外的基因组，为环状双链DNA 结构，全长为16569bp。 一般认为线粒体基因组DNA突变与人类的衰老、进化、神经退行性病变、糖尿病和恶性肿瘤等有关。 mtDNA自身的特点决定了它比核DNA对氧化损伤更敏感 （1）mtDNA 是唯一的核外遗传物质并暴露于活性氧 环境中； （2）线粒体是氧化还原反应的主要场所。mtDNA与氧化还原体系非常接近， mtDNA 呈裸露状态，缺少组蛋白和非组蛋白对DNA 进行保护作用； （3）线粒体本身含有类似微粒体细胞色素P450 氧化酶的催化酶，故可直接在线粒体原位激活一些化学致癌物质； （4） mtDNA 与富含脂类的线粒体内膜相连，使得mtDNA 对脂溶性化学物质及可引起线粒体膜不稳定的因素非常敏感，并往往成为亲电子物质首选的靶点； （5） mtDNA 的复制酶由核DNA 编码，即使mtDNA 损伤十分严重，但如果其相关的复制酶编码基因无损伤或损伤很小，都不会影响损伤的mtDNA复制。这引起mtDNA损伤在细胞内累积，使mtDNA 的突变率比核DNA高10 倍，而且mtDNA 易发生点突变和缺失突变 。 线粒体DNA的氧化损伤: 单链断裂、双链断裂、碱基修饰、DNA交联、烷化损伤 线粒体DNA的损伤修复： 碱基切除修复、错配修复 第三节 细胞周期检查点控制 真核生物细胞DNA受到损伤时细胞除了诱导修复基因的转录外，还可暂时阻断细胞周期，防止受损DNA继续复制，如无法修复，则可诱导细胞进入凋亡。这些都是细胞通过细胞周期检查点控制（checkpoint control，又称关卡控制）对DNA损伤的应答反应。 一、细胞周期 细胞周期：是指细胞从上一次分裂结束开始到下一次分裂终了所经历的过程，通常可分为G1期、S期、G2期和M期。 细胞在G1期完成必要的生长和物质准备，在S期完成其遗传物质染色体DNA的复制，在G2期进行必要的检查及修复以保证DNA复制的准确性，然后在M期完成遗传物质到子细胞中的均等分配，并使细胞一分为二。 G1 CDK M 染色体分离 cyclin 细胞分裂 有丝分裂 G2 DNA合成 染色体复制 S 二、细胞周期调控的核心机制 周期素蛋白——Cyclins（调节亚基） CyclinA、B、D、E、G、H、T… Cyclin依赖的蛋白激酶家族—— CDKs CDK1、2、4、5、6 … 以及CDKs的抑制蛋白—— CKIs p21、p27、p16、p19 … 构成调控周期进程的核心要素 2001年Nobel医学和生理学奖 L. H Hartwell ：鉴定了100多种参与细胞周期调控的基因——细胞分裂周期基因(cdc) CDC28启动基因(p34cdc2) checkpoint：监视、调控周期时相精确运行 Nurse P.M 鉴定了调节cell cycle的许多 基因，例如染色体分离时调控进入有丝分裂通路的基因—cdc2、cdc25 CDK克隆，并在人体细胞鉴定了启动基因——CDK-1/cdc2 CDK活性受cyclin调节；磷酸化与去磷酸化调节；CKIS调节。 Hunt R.T Cyclins，10种，Cycli