第四章 翻译2012.4.6PPT.ppt

第四章 生物信息的传递(下) ——翻译（从mRNA-蛋白质）;一， 蛋白质生物合成的大致框架;翻译（蛋白质的生物合成）: 以氨基酸为原料 以mRNA为模板 以tRNA为运载工具 以核糖体为合成场所 需Mg2+和适当缓冲体系 起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与 合成后加工成为有活性蛋白质;翻译的起始;核糖体沿mRNA5‘ 端向3’ 端移动，开始了从N端向C端的多肽合成，这是蛋白质合成过程中速度最快的阶段;第一节 遗传密码—三联子;Ser;;;4.1.1? 三联子密码及其破译;实验证实三联子密码;返回;一，以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成 制备大肠杆菌的无细胞合成体系：在含DNA、mRNA、tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其他酶类的抽提物中加入DNase，降解体系中的DNA，耗尽mRNA时，体系中的蛋白质合成即停止，当补充外源mRNA或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。因此，分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。;Marshall Nirenberg (1961);以多聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种起读方式：5 ’ ……UUC UUC UUC UUC UUC……3’或5 ’ ……UCU UCU UCU UCU UCU……3’或5 ’ ……CUU CUU CUU CUU CUU……3 ’ 根据读码起点不同，产生的密码子可能是UUC（Phe）、UCU（Ser）或CUU（Leu），所以得到的多肽可能是多聚苯丙氨酸、多聚丝氨酸或多聚亮氨酸，由此可知UUC、UCU、CUU分别是苯丙氨、丝氨酸及亮氨酸的密码子。 ;二， 核糖体结合技术;?; 若用20种AA-tRNA做20组同样的实验，每组都含20种AA-tRNA和各种三核苷酸，但只有一种氨基酸用14C标记，看哪一种AA-tRNA被留在滤膜上，进一步分析这一组的模板是哪个三核苷酸，从模板三核苷酸与氨基酸的关系可测知该氨基酸的密码子。例如，模板是UUU时，Phe-tRNA结合于核糖体上，可知UUU是Phe的密码子。;Ser-C14…. ;4.1.2 遗传密码的性质;先做一个概括总结：;存在61种密码子而只有20种氨基酸，所以许多氨基酸有多个密码子。实际上除色氨酸（UGG）和甲硫氨酸（Met）只有一个密码子外，其他氨基酸都有一个以上的密码子，其中9种氨基酸有2个密码子，1种氨基酸有3个密码子，5种氨基酸有4个密码子，3种氨基酸有6个密码子。 简并：1个氨基酸有多个密码子的现象或多个密码子为1个氨基酸编码。 编码同一种氨基酸的密码子称同义密码子 简并密码的性质有何重要生物学意义？ 减少变异对生物的影响 ;The Genetic Code;同义密码子一般都不是随机分布的，因为其第一、第二位核苷酸往往是相同的，而第三位核苷酸的改变并不一定影响所编码的氨基酸，这种安排减少了变异对生物的影响。一般说来，编码某一氨基酸的密码子越多，该氨基酸在蛋白质中出现的频率也越高。; 肽链内部Met的密码子 AUG 原核生物编码甲酰甲硫氨酸 起始密码 真核生物编码甲硫氨酸 另有三种是终止密码（标点密码子、无意义密码子）， UAA （琥珀密码子） UAG （乳石密码子） UGA （赭石密码子） ;4.1.2.2. 密码的普遍性与特殊性;密码的普遍性与特殊性 有何意义？ 从最简单的生物（病毒）到人类，使用同一套遗传密码。;4.1.2.3. 密码子的变偶性－摆动假说; 根据摆动假说，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。一个tRNA究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的，反密码子第一位为A或C时只能识别1种密码子，为G或U时可以识别2种密码子，为I时可识别3种密码子。如果有几个密码子同时编码一个氨基酸，凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。;密码子、反密码子配对的摆动现象;● Wobble base的摇摆配对原则;4.1.2.4密码子是不重叠的并且无标点 ;遗传密码的总结：;第二节 tRNA(第二遗传密码);作为氨基酸受体的tRNA在结构上必须具备以下识别位点: A、氨基酸接受位点 B、氨酰—tRNA合成酶识别位点 C、核糖体识别位点 D、反密码子 ;4.2.1 tRNA二级结构;;?