第十四章 DNA的生物合成(复制)2013-12-1PPT.ppt

人卫出版社生物化学与分子生物学 第八版 主要学习内容;基因信息的传递;人卫出版社生物化学与分子生物学 第八版 主要学习内容;;?　 —— 　基因！;基因是为生物活性产物编码的DNA片段。 它是以碱基排列顺序的方式储存着生物体所有的遗传信息。 编码的主要产物是蛋白质或各种RNA。;;;* DNA通过基因表达，决定蛋白质的结构、功能;本 篇 主 要 内 容;DNA的生物合成 (复制) DNA Biosynthesis (Replication) ;第一节：DNA复制的基本特征 第二节： DNA复制的酶学和拓扑学变化 第三节： 原核生物DNA复制过程 第四节：真核生物DNA生物合成过程 第五节： 逆转录和其他复制方式;第 一 节 DNA复制的基本特征 Basic Rules of DNA Replication ;复制 (replication) 的概念： 是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。;复制的基本特征：;亲代 DNA;A T C G C T A T C G;　设想： 　　　Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时推测， DNA在复制时首先两条链间的氢键断裂两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链。 　　　这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制。 ;子链继承母链遗传信息的几种可能方式;密度梯度实验： ;;;;半保留复制概念：;亲代 DNA;　　遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的！;专家谈确定曹操DNA经过：曾花3月时间研究古牙（图） ;;*;二、复制的方向性; 复制时 DNA 双链解开分成二股单链，新链沿着张开的二股单链生成，复制中形成的这种 Y 字形的结构就称为复制叉。;*;复制时 DNA 双链解开分成二股单链。;ori;*;　　复制子是独立完成复制的功能单位。 从一个DNA复制起始点开始的DNA复制区。习惯上将两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。 　　;ori;A. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter);真核生物：;概念：指 DNA 复制时，一条链连续合成，另一条链不连续分段合成，最后连接成完整子链的合成方式。;前导链(leading strand)： 　　顺着解链方向生成的 子链，其复制是连续进行 的，得到一条连续的子链， 这股链称为前导链，又称领头链???;3?;DNA复制的特点：; 第二节 DNA 复制的酶学和拓扑学变化 The Enzymology of DNA Replication;参与DNA复制的物质：;指解开了的 DNA 母链单链。;四种脱氧单核苷酸: dNTP;复制的化学反应：聚合反应;聚合反应的连接方式：;本质： 　十余个核糖核苷酸的寡链 ( RNA );聚合反应的特点：;　　以 DNA 聚合酶 为主，包括其他酶和蛋白质因子。;一、DNA 聚合酶;;5′ A G C T T C A G G A T A ? 3′ | | | | | | | | | | |;（一）原核生物的 DNA 聚合酶：;DNA-pol Ⅰ：109kD;323 个氨基酸;DNA-pol Ⅱ：120kD;功能：是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶!;亚基;大肠杆菌三种DNA聚合酶的特性;（二）真核生物的 DNA 聚合酶：;*;DNA 复制的保真性至少要依赖三种机制： ;复制的保真性依赖严格的碱基选择：;A：DNA-pol 的外切酶活性切 　 除错配碱基；并用其聚合活 　 性掺入正确配对的底物。;三、复制中的分子解链及 DNA 分子拓扑学变化;原核生物复制起始的相关蛋白质;;—— 又称 螺旋反稳定蛋白;E.Coli 复制过程中的解螺旋酶和单链 DNA 结合蛋白;*;;（三）DNA 拓扑异构酶 ( DNA topoisomerase ); 作用特点：; 拓朴酶的作用机制：;（四）引物酶 ( primase );*引物酶(primase)与RNA-pol异同 ;引物酶与其他和复制有关的蛋白质形成的复合物。;连接 DNA 链 3?-OH 末端和相邻 DNA 链 5?-P 末端，使二者生成 磷酸二酯键，从而把两段相邻的 DNA 链连接成一条完整的单链。反应需要消耗 ATP 。;5’;DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。 在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 也是基因工程的重要工具酶之一。;参 与 DNA 复 制