第十一章 转录幻灯片.pptVIP

第十一章RNA的生物合成 RNA Biosynthesis 第一节 转录的模板和化学机制 转录模板 DNA双链中的一股链 转录有时空特异性 结构基因（structural gene）:能转录出RNA的DNA区段称结构基因。 不对称转录(asymmetric transcription) 转录是有选择的，在细胞不同发育时序、按生存条件和需要才转录，转录的这种选择性称不对称转录。包含两个含有： ①在DNA双链分子上一股链可转录，另一股链不转录； ②模板链并非永远在同一单链上。 转录的反应体系 模板：DNA的模板链 原料：NTP（ATP、UTP、CTP、GTP） 酶 ：RNA聚合酶 其他：Mg2+、Mn2+ 其它蛋白因子 化学机制 相同点： 第二节 原核生物转录酶及启动子 原核生物RNA聚合酶 全称：依赖DNA的RNA聚合酶（RNA-pol） 原核生物启动序列 操纵子（operon）：原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇地串联、密集于染色体上，共同组成的转录单位，由启动序列、操纵序列、结构基因及调节基因所组成。 启动子（promoter）: 是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列，也是控制转录的关键部位。 对启动子的研究，常采用一种巧妙的方法即RNA聚合酶保护法 第三节 原核生物转录过程 转录延长 转录终止 第四节 真核生物转录过程 真核生物RNA聚合酶 真核生物调控序列 顺式作用元件（cis-acting element ）： 指可以影响自身基因表达活性的DNA序列，分为启动子、增强子和沉默子。 启动子：指的是RNA-pol结合位点周围的一组转录控制组件，每一组件含7-20bp的DNA序列，至少包括至少一个转录起始点以及一个以上的功能组件。 TATA盒:是最具典型意义的组件，共有序列为TATAAAA，通常位于转录起始点上游-30～-25bp,控制转录起始的准确性及频率。由TATA盒和转录起始点即可构成最简单的启动子。 多在转录起始点约-40～-100nt的位置，比较常见的是GC盒和CAAT盒 典型启动子由TATA盒及其上游CAAT盒和（或）GC盒组成，通常具一个转录起始点及较高转录活性 增强子：是远离转录起始点、决定基因的时间和空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列，其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。 沉默子：有的基因含有负性调节元件沉默子，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 转录因子 反式作用因子（trans-acting factors）:能通过与特异的顺式作用元件的识别、结合，反式激活另一基因的转录的蛋白。 转录因子（transcription factors）：反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的因子。 转录过程 转录起始 RNA聚合酶II与启动子的结合、启动转录需要多种蛋白质因子的协同作用，形成转录起始复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 转录延长 真核生物转录延长过程转录与翻译非同步， 可见核小体移位和解聚现象。 转录终止 真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行 第五节 真核生物转录后加工 几乎所有的初级RNA转录物都要经过加工，才能成为具有功能的成熟的RNA 部位：主要在细胞核 对象: mRNA前体的加工 （一）真核生物mRNA生成特点 1.单顺反子：一个mRNA分子只编码一种蛋白 2.断裂基因（split gene）：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称断裂基因。 外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子：隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 具5’-帽子结构 具3’-polyA尾结构 加帽 5’-末端有7-甲基鸟嘌呤的帽结构 加尾 剪接作用：去除初级转录产物上的内含子，把外显子连接为成熟mRNA的过程。 场所:剪接体 由小分子核糖核蛋白组成，将hnRNA结合，使内含子形成套索并拉近上、下游外显子。 套索RNA：内含子区段弯曲，使相邻两个外显子互相靠近而利于剪接。 反应：二次转酯反应 小结：原核与真核转录的不同 原核为多顺反子，含多个结构基因 真核为单顺反子 原核转录酶只一种，直接起始转录 真核有三种转录酶，需蛋白因子的帮助 两者启动子