第三章 细菌感染的实验室诊断（上）PPT课件.pptVIP

第三章 细菌感染的病原学诊断;第一节 标本的采集和处理原则;;二、标本的处理 1.及时送检 2.运送与保存 1）根据待检菌特点对标本进行冷藏、保 温或保持厌氧状态 脑脊液、血液、厌氧菌保存不能冷藏 2）注意安全防护 ;第二节 细菌形态学检查;一、 不染色标本的检查;三、 染色标本的检查;3. 复合染料（中性染料） 碱性染料与酸性染料的复合物，如瑞氏染料、姬姆萨染料等 4. 单纯染料 如苏丹染料，溶于脂肪溶剂，不溶于水，化学亲和力低 ;（二）常用的细菌染色法; 细菌染色的一般程序;1. 革兰染色法（Gram stain） （1）原理 1）细胞壁学说：两种细菌细胞壁通透性不同 2）等电点学说 3）化学学说：两种细菌含有RNA镁盐不同 （2）方法：制片→结晶紫初染→碘液媒染→酒精脱色→复红复染→结果 革兰阳性菌﹙G＋﹚：紫色 革兰阴性菌﹙G－﹚：红色 ;;; 2. 抗酸染色法 细菌着色后不被盐酸酒精脱色的染色方法 染料：石炭酸复红、盐酸酒精、美蓝 方法 初染：5%石炭酸复红加热染色5min 脱色：3%盐酸酒精 复染：吕氏美蓝;;3.荧光染色 金胺O法 4.特殊染色法 细胞壁染色、荚膜染色、芽胞染色、 鞭毛染色、异染颗粒染色 5.负染法 背景着色 ;;;第三节 细菌分离培养和鉴定;（一）培养基的组成成分;（5）血液 提供特殊生长因子、观察溶血 （6）无机盐类 常用元素：P、S、K、Na、Mg、Ca、Fe等 微量元素：Co、Zn、Mn、Cu、Mu等 （7）鸡蛋与动物血清 用于某些特殊培养基 （8）生长因子 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等;2.凝固物质 即赋形剂 （1）琼脂 （2）明胶 动物胶原组织熬制而成 3. 抑制剂和指示剂 （1）抑制剂：胆盐、煌绿、染料、抗生素等 选择培养基：加入一定种类的抑制剂，以抑 制杂菌生长或减少生长，有利于检出菌生长 的培养基。 （2）指示剂： 酚红、中性红、中国蓝等 鉴别培养基：加入特定底物和指示剂;（二）培养基的种类; 液体培养基 固体斜面培养基 半固体培养基;2. 按营养成分和用途分类 （1）基础培养基：只有基本营养成分 （2）营养培养基：加有血液 、血清等 （3）鉴别培养基：含有特定???物和指示剂 （4）选择培养基：含有抑制剂 （5）特殊培养基：厌氧、细菌L型;（三）培养基的选择;;临床标本常规选择培养基;（四）培养基的制备;2. 培养基制备的一般程序;（5）分装 分装量不超过容器的2/3 平板：灭菌后冷却至50 ℃~ 60℃时倾倒 90mm 25~30ml（4mm）：药敏用 90mm 13~15ml(3mm)：培养用 琼脂斜面：分装量为试管的1/5，灭菌后趁热制成斜面， 斜面长度2/3 高层、半固体、液体：分装量为试管长度1/4~2/3