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高中生物选修三核心知识（一） 考点一：基因工程 1．2．基因工程的基本操作程序(填空) (1)目的基因的获取途径： (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建： 表达载体的组成：目的基因＋＋＋标记基因＋复制原点。 启动子和终止子：启动子是结合位点，启动转录；终止子是的位点。 (3)将目的基因导入受体细胞： (4)目的基因的检测与鉴定： 导入检测：技术(使用DNA探针)。 表达检测 个体生物学水平鉴定：如对转基因作物进行等接种实验。 3．蛋白质工程 1、易错判断 (1)启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用() (2)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测 () (3)从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是依据P1氨基酸序列设计多条模拟 () (4)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接( ) (5)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点( ) 2．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将从陆地棉基因库中获取的酶D基因与位于拟南芥叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得转基因油菜品种。酶D基因、转运肽基因所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、Xba)的切点如图所示。请回答下列问题： (1)用限制酶________和________酶处理两个基因后，可得到A、D端相连的目的基因。 (2)将上述目的基因插入如图所示质粒的____ ___中，构建______，然后将其导入农杆菌中。 (3)利用______________法将目的基因导入油菜叶片中，并通过筛选获得转基因油菜细胞，通过_______技术可培育成转基因油菜植株。 (4)用_________法可检测转基因油菜的染色体DNA上是否插入了目的基因，用______法可检测转基因油菜植株中的目的基因是否翻译成蛋白质。 ．金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下，请回答下列问题：(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过________获得________用于PCR扩增。 (2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2)，为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的____________位点。设计引物时需要避免引物之间形成_____________，而造成引物自连。 (3)图中步骤1代表________，步骤2代表退火(复性)，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。 (4)PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏____________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但________的引物需要设定更高的退火温度。 (5)如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有_____(填序号：①升高退火温度　②降低退火温度　③重新设计引物)。1．植物细胞工程的基本技术 2．动物细胞培养 3．动物细胞核移植技术4．动物细胞融合与单克隆抗体 (1)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养( ) (2)细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行 () (3)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理( ) (4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( ) (5)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性( ) (6)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体( ) 2．研究小组用土壤农杆菌与陆地棉叶肉细胞原生质体共同培养获得了转基因陆地棉，过程如下。请回答下列问题：(1)图a表示从已经消毒的叶片中剪取部分植物组织细胞，图b表示制备原生质体，培养皿中要加纤维素酶和果胶酶，其原因是______________。 (2)图c表示用培养基培养原生质体，培养基中加入了适宜浓度的蔗糖，其主要作用是_____________________和__________________。培养一段时间后，将其与土壤农杆菌混合培养，使重组Ti质粒进入________________，重组Ti质粒上___________段携带了目的基因，可以整合到植物细胞的_________________上。然后通过离心(图d)的方法，除去多余的土壤农杆菌。 (3)图e表示将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到含有一定抗生素的培养基中进行培养(图f)，抗生素的作用是____________________。 (4)将愈伤组织转移培养基继续培养(图g)，同时注意调整植物生长调节剂的种类和含量，其原因是______