P53与MDM2基因单核苷1.ppt

肝细胞癌现状 肝癌高居世界肿瘤死因谱的第三位 自20世纪90年代起，我国肝癌死亡率上升为癌症死亡的第二位 广西是我国原发性肝癌高发区，特别是扶绥，发病率达52.79/10万，广西肝癌死亡率为27.31/10万，高居广西肿瘤死因谱首位 研究对象的一般人口学特征 相关危险因素在两组间的分布 哈迪-温伯格平衡 基因型/等位基因频率在两组间的分布 相关危险因素的分层分析 结果 P53基因rs1042522位点的三种基因型在病例组和对照组间分布无统计学意义（P0.05） 按是否患乙肝、是否吸烟、是否饮酒、是否有肿瘤家族史分层，均未发现使患HCC风险增高的基因型 报告人：张艳艳 导 师：余红平 教授 P53基因是重要的抑癌基因，其编码产物野生型P53蛋白 Wtp53的主要生物学功能为引起细胞周期阻滞 诱导细胞凋亡以及促进细胞分化， 而突变型 P53蛋白mtp53可灭活 Wtp53的功能 导致细胞转化和过度增殖而产生肿瘤行为 鼠双微体-2( Murine double minute 2 ，MDM2 )基因是1991年由Fakharzadeh等首次从3T3DM细胞中分离出来的一种癌基因。 近年来对该基因的研究显示，该基因编码的蛋白可以与p53、Rb 、ARF等多种蛋白质结合，在细胞生长、肿瘤的发生和发展过程中起重要作用。 无论是在正常的生理状态下，还是在肿瘤的发生中，MDM2与p53的关系，尤其是MDM2作为负性调节因子抑制Wtp 5 3的激活转录功能以及抑制P53 抗肿瘤活性的作用得到公认。MDM2通过结合并抑制p53功能是MDM2致癌的主要方式，但还存在着非p 5 3依赖的作用机制 生理状态下，p53-MDM2负反馈环既可调节 p53蛋白活性，又可调节MDM2基因的表达，若二者间的平衡被打破，Wtp53持续表达可导致细胞生长的永久性抑制或调亡 ，MDM2表达过强则可抑制p53作用，使其功能丧失，导致细胞增殖，表现出MDM2癌基因蛋白的作用，参与肿瘤的形成 。 MDM2基因的生理功能 正常细胞中，野生型p53和MDM2之间存在着精细的平衡，它们之间形成一自我反馈环。wtp 53的激活能诱导MDM2基因的转录和MDM2蛋白的表达，MDM2蛋白与Wtp53的特异性结合而阻止 wtp53与DNA结合并抑制其反式激活功能，另一方面MDM2还可通过蛋白水解作用而促使wtp53蛋白降解，从而限制Wtp53过高的活性。应激信号可通过抑制 MDM2而使p53激活。 P53一MDM2相互作用的方式有以下几种可能： 1 MDM2基因产物p90与p53结合形成p90一p53复合体，使p53失去与靶DNA结合的能力，进而丧失转录激活和抑制细胞生长转化功能l 。 2 p90能与突变型p53( Wtp53 )蛋白结合,由于二者均各具有促进生长转化的能力,相互结合后可协同作用，获得更强的促进细胞转化和恶性变的能力 单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）: 是基因组水平上由单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性，在人群中的发生频率大于1%，包括单个碱基（A,T,G,C）的转换、颠换，以及单个碱基的插入、缺失等表现形式。是人类可遗传的变异中最常见的一种。（在人类遗传基因的各种差异，有90%都可归因于SNP所引起的基因变异。在人基因组中，每隔100至300个碱基就会存在一处SNP。每3个SNP中有2个会是胞嘧啶（C）和胸腺嘧啶（T）的相互转变。） 1 以序列为基础的选点策略 采用PCR—测序技术路线对基因单核苷酸多态性筛查，寻找合适的遗传标记和潜在的功能多态，对象是错义SNP和调控区SNP等较有可能具有功能学价值的SNP,其优势在于将所选SNP的生物学价值可能性最大化，也便于进一步对这些SNP进行功能性评价 2 以标签SNP与潜在功能学SNP相结合的选点策略 首先，以Hapmap数据库为主要来源进行标签SNP的筛选，研究区域包括基因和其上下游的侧翼序列，然后将Hapmap获得的数据信息导入Haploview软件，以两两比较的r2界值0.8作为取舍标准来覆盖所有MAF=0.05的SNP，考虑所选SNP可能的功能学价值，即当多个SNP位点都可以作为标签时，优先选取引起氨基酸改变的错义SNP 一是 SNP潜在的功能性，这部分主要依据生物信息学的证据 二是SNP的群体遗传学特征，主要依据基因频率和连锁不平衡状况，我们要选择频率高于5%的改变氨基酸序列的SNP用于进一步的关联研究，因为这些更有可能是功能性的变异。对于非编码区SNP的选择，我们主要依据群体遗传学的特征，首先不可以与已经选择的SNP存在强的LD，其次应该属于中高频SNP，这样在统计学上