梅毒丙肝抗体检测与报告课件.pptVIP

梅毒、丙肝抗体检测与报告 长沙市疾病预防控制中心 2011年4月 梅毒抗体检测与报告 梅毒syphilis 梅毒是苍白（梅毒）螺旋体Treponema pallidum感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 流行形势日益严峻 例：1999年报告病例80406例，年发病率为6.50/10万,2009年报告病例327433例，年发病率为24.66/10万，发病率年均增长14.3%。1997年先天梅毒报告病例数为109例,报告发病率为0.53/10万活产数，2009年报告病例数为10757例，报告发病率为64.41/10万活产数，发病率年均增长49.2%。 分类 先天性梅毒 后天性梅毒：Ⅰ期梅毒（2~4周） Ⅱ期梅毒（6周~6个月） Ⅲ期梅毒（两年及以上） 常规检测方法：病原学检查 血清学检查 非常规检测方法：PCR 胶体金法 免疫蛋白印迹法 化学发光法等 病原学检查 暗视野显微镜检查——金标准 渗出液混于盐水中，暗视野直接镜观察 活体组织检查 常用镀银染色法和荧光抗体染色法 多功能显微诊断仪（MDI） 屏幕线性放大15000~20000 倍的高清晰度显微镜，待检查标本不需染色及任何加工处理，直接观察 血清学检查 非梅毒螺旋体抗体血清学试验 VDRL性病研究实验室玻片试验 推荐用于检测脑脊液的方法, 对神经梅毒有重要价值。 USR血清不需加热反应素玻片试验 RPR快速血浆反应素环状卡片试验 均属VDRL 的改良试验, 由于在抗原中加入氯化胆碱和EDT A 等试剂, 使血清不必加热处理既能达到灭活和使抗原保存期延长 TRUST甲苯胺红不加热血清试验 TRUST甲苯胺红不加热血清试验 原理与RPR相同，但以甲胺苯红染料颗粒代替炭颗粒作为指示物。 疗效判断： 3个月1次，或半年1次。早期梅毒滴度下降快，晚期或不变。滴度升高4倍考虑复发。 前带现象：由于抗体的过量使得抗原抗体反应的比例不适宜而出现假阴性反应。 血清固定：某些病人经治疗后血清抗体滴度若干年内保持低滴度阳性反应。（排除神经梅毒） 血清学检查 梅毒螺旋体抗体血清学试验 FTA-ABS荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验 TPHA梅毒螺旋体血凝试验 间接血凝实验 TPPA梅毒螺旋体明胶凝集试验 ELISA酶联免疫吸附法 TPI梅毒螺旋体制动试验 检测血清中是否存在抑制TP活动的特异性抗体 鉴别生物学假阳性 FTA-ABS荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验 方法： 血清灭活（56℃30min）→血清吸收（37℃30min）→血清加抗原片上孵育（37℃30分）→洗涤吹干→加荧光抗人抗体孵育（37℃30min）→洗涤吹干→封片（碱性甘油）→读片 结果：在荧光显微镜下,均匀地发出中等或高强度的苹果绿色荧光为阳性,均匀地发出弱苹果绿色荧光为弱阳性,呈微弱黄色光或观察不到荧光为阴性。 常规方法中检出率最高 TPPA梅毒螺旋体明胶凝集试验 原理：梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应。 前带现象：以定量抗原检测抗体，若抗体过剩，可使所形成的免疫复合物反而减少，而不出现凝集。 如未致敏颗粒出现凝集反应，应进行吸收处理后再进行试验。 ELISA酶联免疫吸附法 采用梅毒螺旋体特异性抗原包被微孔板，用以检测患者血清中的梅毒抗体 对各期梅毒均有较高的敏感性和特异性 其产生的抗体可以长期存在，故ELISA阳性不能确定感染期，也不能用于临床的疗效观察 非常规检测方法 PCR聚合酶链反应 早期梅毒诊断 胶体金法 快速诊断法 化学发光法 可作为梅毒大规模筛选试验 免疫蛋白印迹法 检测特异性Tp-19(s) -IgM 抗体，诊断早期先天性梅毒 PCR聚合酶链反应 荧光PCR 荧光探针标记检测扩增片段，如Tp polA特异性片段 一期梅毒诊断中有极高特异性和敏感性, 可作为一期梅毒早期诊断的依据。 脑脊液FQ-PCR检测,可以快速准确的诊断神经性梅毒。 二期梅毒诊断中，传统血清学法优于荧光定量PCR法。 正确选择梅毒血清学试验程序 先以非梅毒螺旋体抗体血清试验（TRUST等）进行初筛，再以梅毒螺旋体抗体血清试验（TPPA等）进行确认。 同时进行梅毒螺旋体抗体血清试验和非梅毒螺旋体抗体血清试验。 先进行梅毒螺旋体抗体血清试验（