原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
小鼠腹腔巨噬细胞的分离及其功能性观察
细胞生物学实验
小鼠腹腔巨噬细胞的分离及其功能性观察
实验目的
1. 学习小鼠腹腔巨噬细胞的制备技术；
2. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬蟾蜍红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及其意义；
3.掌握小鼠腹腔注射给药及脊椎脱臼处死方法。
二、实验器材
显微镜，注射器，盖玻片，载玻片，滴管，试管，烧杯，离心机，离心管
三、试剂
1. 任氏液：
Nacl 6.5g
KCl 0.14g
Cacl2 0.12g
NaH2PO4 0.01g
NaHCO3 0.20g
蒸馏水 1000ml
2. 阿氏液（红细胞保存液）：
葡萄糖 2.05g
柠檬酸钠 0.89g
柠檬酸 0.05g
NaCl 0.42g
蒸馏水 100ml
调pH至7.2，过滤灭菌或高压灭菌10min,置4℃冰箱保存。
3. 4%台盼蓝染液：
台盼蓝 4g
NaCl 0.9g
蒸馏水 100ml
4．6%淀粉肉汤：
牛肉膏 0.3g
蛋白胨 1.0g
NaCl 0.5g
蒸馏水 100ml
加入可溶性淀粉6.0g，加热促使溶解，再煮沸灭菌，置4℃冰箱保存，使用时以水浴融化，加入适量4%台盼蓝染液混匀。
5. PBS溶液
6. 3%NaHCO3溶液
四、生物材料
1．小鼠（体重20g左右）；
2．1%蟾蜍红细胞悬液：采用穿刺法处死蟾蜍后，迅速从心脏采血1ml,放入盛有4ml阿氏液的瓶中，混匀置4℃冰箱保存备用，使用前加入任氏液离心（1500rpm,10min）洗涤两次，再用任氏液配成浓度为1%的细胞悬液。
五、实验步骤
1. 先用右手抓住鼠尾提起，放在实验台上（或放在篮子里，方便固定），用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈皮肤，将鼠体置于左手手心中，把后肢拉直，用左手的无名指和小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，即可在腹部1/2处的一侧注射。
2. 实验时，取一只小鼠，腹腔注射1%蟾蜍红细胞悬液1ml。（一定要刺破腹腔，不能注射到皮下）另一只小鼠，先腹腔注射1ml淀粉台盼蓝溶液，再腹腔注射1%蟾蜍红细胞悬液1ml。
20-30分钟后，用CO2麻醉后再以颈部脱臼法处死小鼠。
以酒精棉球润湿小鼠腹部的表皮。用镊子提起表皮，用剪子剪一个“T”型切口
文档评论（0）