医药卫生霍乱检测课件.ppt

弧 菌 属 (Vibrio) 侯 珏 临 床 微 免 教 研 室 目的与要求 1、掌握霍乱弧菌及副溶血弧菌的主要生物学性状、微生物鉴定方法 2、 熟悉霍乱弧菌及副溶血弧菌致病性 一、概述 弧菌科包括4个菌属 弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光杆菌属 共性： 革兰氏染色阴性 氧化酶阳性 发酵糖类 具有极端单鞭毛 弧菌属 分布广泛, 水中最多 共36个种, 引起人类致病的14种 短小弧形, 革兰阴性菌 单鞭毛 能发酵葡萄糖 氧化酶阳性 对弧菌抑制剂O/129 （二氨基二异丙基喋啶）敏感 钠离子能刺激其生长 一 霍乱弧菌(Vibrio cholerae) ?霍乱弧菌是霍乱的病原菌 我国《传染病防治法》: 甲类传染病 国际检疫的烈性传染病 到目前为止共发生了七次霍乱世界大流行 流行情况 1817-1923年 六次大流行 （均从印度恒河三角洲发源地） 古典生物型 1961年 第七次大流行 El Tor生物型 1992年 亚洲流行（印度、盂加拉、泰国） O139群 一、生物学特性 形 态 与 染 色 革兰氏染色阴性 弧型或逗点状,米泔水样粪便涂片镜检：可见“ 鱼群样排列 单端单鞭毛，无荚膜，无芽胞 活菌悬滴镜检, 可见“ 穿梭或流星状运动” 霍乱弧菌（革兰染色，1000倍） Vibrio cholerae with its single polar flagellum. 营养要求不高，生长较快 兼性厌氧 最适生长温度： 37℃ 怕酸嗜碱，最适pH:7.2-7.4 pH:7.4-9.6快速生长 培 养 特 性 选择性的增菌培养基:碱性蛋白胨水pH8.5 常用的强选择性培养基： 庆大霉素琼脂(GTA)pH8.4-8.5 四号琼脂pH8.4 硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板 (TCBS琼脂)pH8.6 常用的弱选择性培养基： 碱性琼脂pH8.4 碱性胆盐琼脂pH8.4 培 养 特 性 菌落特征 TCBS琼脂：形成圆形、微凸、表面光滑 湿润整齐、大黄色菌落 庆大霉素培养基：扁平、湿润、半透明菌落中心呈灰褐色 血琼脂上形成的菌落较大，EL Tor生物型可形成β-溶血 霍乱弧菌培养于TCBS琼脂（37℃，18小时） 发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色 生 化 反 应 发酵葡萄糖、甘露醇、蔗糖，产酸不产气 能分解色氨酸 赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶（+） 精氨酸双水解酶（-） 氧化酶（+） 抗 原 性 O抗原：耐热，耐受100 ℃ 2h 特异性高，分群和分型的基础 H抗原：不耐热，特异性低 抗 原 性 根据O抗原不同: 霍乱弧菌分155个血清群 根据与O1抗血清凝集与否： O1群 ：与O1抗血清凝集（+） 非 O1群： 与O1抗血清凝集（-） O1群 根据表型差异： 古典生物型 EL Tor生物型 菌体抗原（A、B、C)不同：小川型(AB) 稻叶型(AC) 彦岛型(ABC 性状\生物型 古典型 EL Tor Ⅳ组噬菌体裂解 + - Ⅴ组噬菌体裂解 - + 对多粘菌素B的敏感性 + - 鸡RBC凝集 - + 羊RBC溶血 - + V-P - + 霍乱弧菌两个生物型 的鉴别 鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生理盐水一滴，取被检菌18-2