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第十一章 其它病原微生物 第一节 霉形体 猪肺炎霉形体（M.Suipenumoniae） 禽败血霉形体（M.gallisepticum） 第一节 霉形体 霉形体（Mycoplasma）又叫支原体，是以缺乏坚硬的细胞壁和胞壁酸、二氨基庚二酸等合成细胞壁的基础成分为基本特征的微生物，介于细菌和病毒之间，能够独力生活的最小、最简单的原核生物，呈现高度的多形性。较小的个体可以通过细菌滤器。霉形体可以人工培养形成典型的具有特色的菌落，在固体培养基上形成特征性的“煎荷包蛋”状菌落。霉形体含有DNA和RNA，以二分裂或芽生方式繁殖。对青霉素有抵抗力。霉形体以腐生、共生或寄生的方式广泛分布于污水、土壤、植物、动物和人体中，常常造成实验室的培养细胞以及生物制品污染。对人体或畜禽有致病性的霉形体，目前已经知道的有30多种。 1700年发现牛传染性胸膜肺炎的病原，1898年Nocard等首先以无细胞人工培养基分离培养成功，称为胸膜肺炎微生物（Pleuro pneumonia organism，PPO）。接着先后从人、猪、马、羊、犬、猫、鸡、鸭、大白鼠、小白鼠等动物，以及昆虫、植物、土壤、污水和培养的组织中发现有此类微生物的存在。虽然不一定引起胸膜肺炎，但在形态与培养特性等方面与PPO极为相似，统称为类胸膜肺炎微生物（Pleuropneumonia like organism ，PPLO）。1956年Edward和Freund首次提出以Mycoplasma的命名取代PPLO。1967年Edward和Freund正式提出霉形体目(Mycoplasmatales)应该归属于原核生物界原生物门（Tenericutes）的柔膜体纲（Mollicutes）。 一、形态结构及染色特性 霉形体缺乏坚韧的细胞壁，只有胞浆膜，故细胞柔软而且形态多变，具有高度的多形性。常呈球形、杆状和丝状，偶见有梨状、分枝状、环状、螺旋状等不规则的形状。球状菌体大小不一，最小的125~250nm，大的2~10μm;丝状菌体短的为数μm，长的达到150μm。部分霉形体可以通过细菌滤器。霉形体的细胞膜具有三层结构，内、外主要是蛋白质及糖类，中间层主要是脂质，生长需要胆固醇的霉形体，其细胞膜脂质中约含有36%的胆固醇，因此凡是能够作用于胆固醇的物质，如皂素、洋地黄苷、两性霉素B等可以破坏霉形体的细胞膜，使之死亡。有些霉形体在细胞膜外还有一层由多聚糖组成的微荚膜。霉形体的细胞浆中有核糖体，具有DNA和RNA两种核酸，呈不规则的丝状排列。霉形体无鞭毛，某些能滑动。革兰氏染色呈阴性，通常着色效果不好，以姬姆萨氏或瑞氏染色效果较佳，呈淡紫色。 二、生物学特性 霉形体的生物合成能力较弱，虽然能够在人工培养基上生长，但营养要求比一般细菌高，常常需要在培养基中加入胆固醇、血清、腹水、牛肉浸膏和酵母浸汁等特殊成分。一般能够利用葡萄糖和精氨酸，需氧或兼性厌氧。最适PH7.8~8.0，最适温度一般为37℃。 霉形体在血清肉汤培养基中生长呈乳光样轻度浑浊，在固体培养基上3~5d后出现微小菌落（初次培养需要1周左右才开始形成菌落），直径在10~60μm之间，需要用低倍显微镜进行观察。用固体培养基分离培养时，在有氧的条件下含5%CO2和95%N2的环境中，生长情况最佳，琼脂浓度以1%~1.5%为宜。菌落呈圆形，边缘整齐，透明，表面光滑，菌落中心色暗致密，深入培养基中，边缘薄圆，呈“煎荷包蛋”样或乳头样外观。在血液琼脂培养基上为α-溶血。多数霉形体可以在9~11日龄的鸡胚绒毛尿囊膜或卵黄囊与培养组织上生长，有些菌株可以引起鸡胚死亡。霉形体可以在细胞培养中生长，不一定都引起细胞病变，但是影响病毒的细胞培养。 霉形体的繁殖方式主要以二等分裂繁殖，也有出芽、分支或由球状细胞伸展成长丝，然后分节，成为许多球状或短杆状细胞。 霉形体对理化因素的抵抗力比细菌弱，相对较敏感。一般加热45℃ 15~30min，55℃5~15min即被杀死。在含有0.3%琼脂的半固体培养基中在-20℃可以保存一年或更久。-26℃~ -60℃中，含菌落的琼脂块可以保存一年，加10%脱脂乳经干燥可以保存3~4年。对重金属盐、石炭酸、来苏儿等较细菌敏感，对表面活性剂、脂溶剂极为敏感。对醋酸铊、结晶紫及亚硝酸盐等抵抗力较细菌强，此类试剂可以作为培养霉形体时的抑菌剂。对青霉素、环丝氨酸和溶菌酶不敏感，但四环素类抗菌素、卡那霉素、链霉素、红霉素等能够抑制或影响其蛋白质合成。 一般根据霉形体对糖类分解利用能力的差异，可以将其分为两群。一群能够分解葡萄糖以及其它多种糖类产酸不产气，如麦芽糖、甘露糖、木胶糖、果糖、半乳糖、糊精和淀粉等，称为发酵型；另外一群不发酵糖类，但是能够利用脂肪酸以及氨基酸，尤其是能够利用精氨酸作为碳和氮的来源，称为非发酵型。有少数几种