食品微生物课件3-3_培养基与微生物的控制.pptx

3Chapter培养基与微生物的控制CONTENTS01微生物培养基02有害微生物的控制03菌种的衰退、复壮及保藏1 微生物培养基定义：培养基（medium）：是人工配制的，适合微生物生长繁殖或 产生代谢产物的营养基质。 培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用的工作基础 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素： 碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子、水1.1 选用和设计培养基的原则和方法在微生物学研究和生产实践中，配制合适的培养基是一项最基本的要求。 原则1、根据微生物的营养需要配制培养基2、营养协调----合适的浓度及配比3、物理、化学条件适宜—pH, aw, 氧还电位4、经济节约5、精心设计、试验比较1.1.1 根据微生物的营养需要配制培养基培养不同的微生物必须采用不同的培养基:细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）；放线菌：高氏1号合成培养基；酵母菌：麦芽汁培养基；霉菌： 查氏合成培养基。培养目的不同，原料的选择和配比不同:例如枯草芽孢杆菌：一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基。培养基成份牛肉膏蛋白胨-细菌LB-细菌高氏1号-放线菌查氏-霉菌麦氏琼脂-酵母菌无氮自生固氮菌、钾细菌主要作用葡萄糖1 g10 g碳/能蔗糖30 g碳/能淀粉20 g碳/能酵母膏5 g2.5 g……牛肉膏3 g蛋白胨10 g10 gNaCl5 g5 g0.5 g0.2 gKNO31 gK2HPO40.5 g1 gMgSO40.5 g0.5 g0.2 gFeSO40.01g0.5 gNaNO32 gKCl0.5 g1.8 g醋酸钠8.2 gKH2PO40.2 gCaSO40.2 gCaCO35 g琼脂15-20 g20 g15-20 g15-20 g水1000 ml1000 ml1000 ml1000 ml1000 ml1000 mlpH7.0-7.27.07.2-7.4自然自然7.0-7.2灭菌121℃ 20min121℃ 20min121℃ 20min121℃ 20min113℃ 20min113℃ 20min1.1.2 营养协调----合适的浓度及配比营养物质之间的配比适宜营养要素：水 碳源+能源 氮源 磷、硫 钾、镁 生长因子含量：~10-1~10-2~10-3~10-4~10-5~10-6营养物质的浓度适宜高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀菌作用。设计的依据微生物细胞的元素组成以及代谢产物的成分等营养物质之间的配比适宜碳氮比(C/N)：严格地讲应当是培养基中所含碳源中的碳原子摩尔数与氮源中氮原子摩尔数之比。但是也可以粗略地将培养基中的还原糖与粗蛋白之比，或者培养基中碳源与氮源含量之比称之为碳氮比。发酵生产谷氨酸时：碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。 NaC5H8O4N1.1.3 物理、化学条件适宜—pH, aw, 氧还电位 1) pH培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。?通常培养条件：?细菌与放线菌：pH 7-8?酵母菌和霉菌：pH 4.5-6 范围内生长嗜极微生物：嗜碱 / 嗜酸性微生物培养基的初始pH随着生长代谢而发生改变，可通过内源调节和外源调节法维持培养基pH的相对恒定，1）pH内源pH调节法----在培养基中加入pH缓冲剂（1）磷酸盐缓冲液调节法磷酸盐等摩尔比时， pH 稳定在 6.8;不同浓度比时， pH 稳定在 6.0—7.6 之间。大量产酸的生长代谢过程则超出其缓冲范围，多用碳酸钙法。1）pH内源pH调节法----在培养基中加入pH缓冲剂（2）CaCO3调节法利用了CaCO3微溶于水，其存在不影响培养基pH；以及 酸性条件下存在下列反应特性：1）pH 内源pH调节法----（3）培养基中存在的天然pH缓冲剂， 如蛋白质、胨、氨基酸等两性电解质。 H 丙氨酸（alanine)CH3—C—COOH NH2外源pH调节法从外界向培养基中流加酸或者碱液3）氧化还原电位氧化还原电位又称氧化还原电势，是度量化学反应系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，通常以氢电极为参比确定电极电位，其单位是V（伏）或mV（毫伏）。系统氧化还原电位值越高，还原剂释放电子的能力愈强；反之，系统还原剂释放电子的能力愈低。 3）氧化还原电位 不同类型微生物生长对氧化还原电位(Ф/ Eh)的要求不同好氧性M：+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3～+0.4伏为宜；厌氧性M：低于+0.1伏条件下生长；兼性厌氧M： +0.1伏