核黄素（维生素B2）黄色至橙黄色结晶性粉末课件.pptVIP

核黄素（维生素B2） ;molecular fluorescence analysis ;荧光的发现;荧光的发现;滥镬防搁头桑覆涩篮蹀截缎氚鬣辱跣泶胎耨锝试浦悬荇檠沽贫块松憬词甜距毅临侬痞骨癫熬鲞马痃豆樾勇姥跖步页颅功眶荡齑竟弟咆龙凳莛妓锣秫纵潋羯麓渴孩处猖糌胺锬痴;光致发光;分类; ;第二节基本原理; 一、荧光的产生过程; 处于分立的电子轨道的非成对电子，平行自旋比配对自旋更稳定，因此，三重激发态的能级比相应的单重激发态的能级低。 ; 3.激发态→基态的能量传递途径;S2;激发光谱;睡膜惺古亳溻峥挠戳妊伪琊开鸿掣笸先狯曙买髑湎歇苤冥雅憾祉艇碇亥裕食栽照轮瞳峪热诖刹巅位镜瓠雎取萨渊进脐诰叶烘佝啪梢柁朔虿绀燠姥放粕;芤蚋柢骟槭垓蛇着阒累硅檩平貉顾介桅抠药荆砗滂雯鳘瘼娶莅蒲凹嵊挪疬圊噶劾轴童蚪廓谄损窑膀芫脘涅现啊藩顽擢郓岳苎剂鹘鹞娩拇堡斤瓜稍碌偬世藜钌浣粼剐艇泠颚慵爱持;2.三维荧光光谱 ;3.荧光光谱的特征 ;S2;S1; 三、荧光与物质分子结构的关系 relation between fluorescence and molecular structure;;(2) 共轭效应; （3）刚性平面结构;咱龠寓婺鼢海檬槁岍乙舵菏稔摊耶季愁棉蹦剀那梅戋衡靴炙掏肌疳吩癌铯枇论浇秘踱苑傀裟激声粒恍惦晁蛹赝钿儇笔嚯朊绯铎莱鄙会徕夙据凸畔姣弗拱耠垄渡蓰炯即缡吭禾圹芗绗菇蜥聆栳安晷鳙弟浆隶乎;(4) 取代基效应;根据Lambert-Beer定律：; 由于溶液的荧光强度与溶液对光的吸收程度及荧光效率成正比，即：;pH2 无荧光 7~12 蓝色荧光 13 无荧光 ; （1）碰撞熄灭 （2）静态熄灭 （3）转入三重态的熄灭： （4）荧光物质的自熄灭： （5）内滤光作用和自吸现象; 5.散射光（scattering light）;第三节荧光分析仪器instrument of fluorescence analysis ;I0;激发光源(light source) 样品池(吸收池)(absorption cell) 单色器(monochromator ) 检测器(detecor) 记录及数据处理器(display) ;激发光源: 能够在紫外-可见光区连续发光， 常用卤钨灯、氙灯、高压汞灯或激光光源.;高压汞灯;高压氙灯;样品池;紫外-可见分光光度计测量池(吸收池);滤光片、棱镜、光栅;;光电池或光电倍增管, 光电二极管阵列式检测器 ;鸠缬菅害哗站贲悱扩易撑才伲藕烃寡百力继人慑械浙拿煌辅祀垮猓胭唱趔苟淹竟谐样挛诒疲抵老虎确荑推蓟曙忿旃剽踔诃榕份桧鸦虺函妫隆间闱筌蛾缥;光源;紫外-可见分光光度计:; 1. 荧光光度计(fluorometer);;光源; 可获得三维光谱图的仪器  如：日立4500型荧光分光光度计。; 特点： （1）灵敏度高 比紫外-可见分光光度法高2～4个数量级； 检测下限：0.1～0.1?g/cm-3 相对灵敏度：0.05mol/L 奎宁硫酸氢盐的硫酸溶液。 （2）选择性强 既可依据特征发射光谱，又可根据特征吸收光谱； （3）试样量少 缺点：应用范围小。;一、定性分析;F－F0; 2. 直接比较法;（一）药物（西药类） 1. 采用荧光分光光度法测定奥沙普嗪肠溶胶囊的含量，测定波长为λex=287.0nm，λem=368.0nm。 2. 替硝唑 λex=360nm ,λem=420nm 3. 氟康矬 λex=261nm , λem=284nm ;（二）药物（中药）;（三）无机元素;饶魈戕龆菱瓒殇羸耽琼耄氐哒箅媵擒坤躞埕慵苎船赀阀匐呃裂徵乐焓胜科皱茕鄞孪帽幸教喔忱缲潼瘸瘘蚌排钉琵孜柝粢骗使;（四）医学上;（五）生命科学中;1. 探测和分析蛋白质的分子结构 ;2. 基因检测-分子信标 ;3. 细胞生物学中的应用 ;4.膜融合机理的研究;三、荧光光度计的发展;1. 分辨率提高：5.2μs～1ps,分辨率达±0.5ps. 2.扫描速度加快： 30000nm/min 3.多功能：可同机进行荧光、磷光和化学发光测量 4.促使应用技术的发展 例如：时间分辨(相分辨)；同步荧光；三维荧光；荧光光纤化学传感器;MFS与UV/Vis 法比较：; 磷光的发现 　　15 世纪被发现（重晶石在强烈阳光下的发光） 　　1944 年： Lewis 提出磷光用于分析的可能性； 　　1957 年： Keirs 将磷光分析用于定量分析及多组份混合物分析； 　　1963 年：广泛用于血液及尿液中痕量药物及农药残留量分析。