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毛细管电泳电导检测器 第16巷第2期 1999年l0月 中国科学靛研究生院 Jollr【lalGraduateSch~~,Academiasialca Ⅷ16No2 Oct.1999 2e—Ij0毛细管电泳电导检测器 袁倬斌张书胜(=)6袁倬斌熊辉张书胜/,(丰院化学教学部) 摘要对用于毛细管电泳中的电导检测器的研究及应用进行了总结.并展望了其 发展前景 关键词毛细管电泳,电导检测器 槌电宁桎测器 CF, 蜃翌 毛细管电泳(cE)是离子或荷电粒子以电场为驱动力.在毛细管中按其淌度或(和)分配系 数不同进行高效,快速分离的一种电泳新技术具有进样量少,绝对灵敏度高,分辨率高的特 点,在化学,生命科学,药物分析,环境分析等许多方面得到广泛应用[1],最初由Mikkers[2]等 人及]orgenson和Lukac介绍cE技术的广泛应用和深入发展面临的主要挑战是在检测方 面|,十几年来.人们在检测方法和检测器方面进行了大量和卓有成效的研究,已开发出许多 类型的检测器.包括直接,间接紫外检测器_5】,荧光检测器【3],放射性同位素检测器[,质谱 检测器一L2],电化学检测器_I等,电化学检测器包括安培检测器和电导检测器.电导检 测器广泛用于离子色谱_I,很少用于毛细管区带电泳[],这主要由于在内径≤100m的熔 硅毛细管中设计一个死体积小的电导检测器非常困难,第一个用在毛细管等速电泳中的电导 检测器由VanderSteen[1~}描述,在CZE中由Mikkers等人描述虽然用于cE中的电导检测 器研究时间不是很长,然而已有很大进展本文对CE电导检测器的研究进展及应用进行评 述.并对其发展前景进行展望 1cE电导检测器的工作原理 CE电导检测器由电导池,测量电源,测量电路和指示仪器等组成它是基于测量两电极 间由于离子化合物的迁移引起的电导率的变化, 2cE电导检测器的种类及应用 根据检测器与毛细管的位置,一般分为三种;在柱型(on-column),柱端型(end-column)和 离柱型(off-coln). 2.1在柱电导检测器 Mikkers等人早在1979年就将电导检测器用于毛细管电泳中,但由于受到装置的限制. 检测器灵敏度不高,样品负载大,导致峰型不对称.1986年,F(}九e1[等人用微压模法(mi一 收稿日期:1咻30 126 1999年曩悼麓等:毛细臂电诛电导柱测器10月 croscalemolding)设计了一个与在线紫外检测器一起联用的在柱电导检测器,检测了一些阴离 子,检测限为2×10M,Huang_1刮等发展了一种比较复杂的电导检测器,用计算机控制的 激光在距毛细管出口7cm处,沿着直径打穿一个中40的小孔,将两根25pmPt丝固定到 孔中作电极,Pt丝准确相对,以减少使用高压电场在两电极间引起的电势差.用一个振荡频 率为3.5kHz的直流电导回路,测量并放大在指示电极之间的电压改变,这种电导检测器有 几大优点:①两电极间的电位差在300V/cm电势中小于0.3V,可消除电极间的电化学反应; ②可获得很高的分辨率;③无死体积,检测体积小i④就能量和费用方面比较经济,但基线漂 移是其主要缺点.用该检测器检测了Li,Na,K和Rb,检测限为10～mol/L,定量测定了 血清中的Li和低分子量毁酸_加,在保持分析离子浓度与背景电解质浓度不变的情况下, 可通过稀释缓冲液(背景电解质)来提高检测灵敏度[2. 2.2柱端电导检测器 1991年,Huang_2等人报道了一种柱端电导检测器,他们将Pc丝微电极用环氧树脂固 定在1crfi长的熔硅毛细管中,将面对分离毛细管的端平磨平,再将它安装在355mi.d的粗 毛细管中.其一端用环氧树脂固定在电极座架上,另一端伸出1--2mm与毛细管出口对接.其 间有一间隙作溶液通道.整个结构装进塑科套管中,浸入装有地电极的电极槽中.塑料套管 中有--d孔供毛细管中的缓冲液液出,其示意图见图1,用该检测器检测了六种羧酸.该检 测器容易制备,不受高压产生的电干扰影响,其灵敏度与以前的在柱电导检测器和柱后安培检 测器差不多,但分辨率低一些,且引起区带增宽, 在这基础上,Huang等人又设计了一种简单的柱端电导检测器.在离毛细管出口7c 处,用计算机控制的激光打一个40,umo.d的小孔,从毛细管末端插入一根Pt丝或不锈钢丝. 丝的端面刚好与毛细管小孔下部相切,毛细管出口端用环氧树脂密封,外面套上有孔的保护 套,该孔与毛细管小孔对齐.这种检测器死体积小.区带柱外增宽小,其示意图见图2. 图1cAl电极与塑料套管装配截面囝 (B)柱端检测器微电投放大囝 L:导线;EPOXY:环氧树脂;TW:TEFFON垫圈;I4:孔 C:毛细管:B0:塑料壳傩ME:散电概:G:流出物间晾 sc:分离毛细管 L 图2挂端检