Q开关和长脉宽1064nm NdYAG激光真皮胶原重建疗效比较性.docVIP

Q开关和长脉宽1064nm NdYAG激光真皮胶原重建疗效比较性 　　[摘要]目的：本研究拟定量地比较Q开关和长脉宽1064 nm掺钕：钇-铝石榴石（neodymium-yttrium-aluminum garnet， Nd：YAG）激光诱导真皮胶原重建的疗效。方法：应用Q开关和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光分别对36只雌性昆明小鼠左侧后背皮肤进行连续4次治疗，每次间隔1周，右侧相应的部位作为自身对照。分别于第1次治疗后1h、1天、7天、21天、30天和60天对小鼠皮肤行活组织取材。应用免疫组化方法分别对皮肤组织样品中真皮I、III型胶原进行检测，染色结果应用Motic医学数字图像分析系统进行定量分析。结果：与正常对照组相比，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗后7天、21天、30天和60天，真皮I型胶原及III型胶原水平明显增高（均P 　　[关键词]非剥脱性激光嫩肤；胶原重建；Nd：YAG激光 　　[中图分类号]R332 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）02-0121-04 　　Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光是目前临床上较常用的两种非剥脱性嫩肤技术，二者波长相同，属于发射近红外光波长的激光，但因脉宽不同，与皮肤组织的相互作用方式不同。Q开关1064 nm Nd：YAG激光主要是对皮肤组织产生光机械作用诱导真皮胶原重建而嫩肤 [1-2]，而长脉宽1064 nm Nd：YAG激光主要是通过光热效应达到嫩肤的目的[1，3]。 　　迄今为止，缺乏系统性的对Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光诱导真皮胶原重建疗效的比较性研究，本研究以雌性昆明小鼠作为实验动物模型，利用免疫组化方法和计算机图像分析系统定量地评价和比较Q开关和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光诱导真皮胶原重建的疗效，以揭示二者引起胶原重建的特点，为指导临床实践提供理论依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 实验动物：雌性昆明小鼠36只，8～10周龄，体重约30g， 由复旦大学上海医学院实验动物中心提供，按取材时间点不同随机分6组，每组6只。 　　1.2 激光照射：参照文献[1-2，4]，实验前24h将小鼠背部皮肤应用市售脱毛膏行脱毛处理，然后于10%水合氯醛1ml/kg腹腔内注射麻醉下行激光照射治疗，治疗参数如表1，分别对小鼠左侧背部上下部位行Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064nm Nd：YAG激光治疗，右侧相应的部位作为自身对照，照射激光的光斑有10%重叠，每个部位重复照射3遍，共连续治疗4次，每次之间间隔1周。第1次激光照射后1h、1天、7天、21天、30天和60天分别对小鼠皮肤进行活组织取材，其中第3次和第4次取材是在相应的治疗前，皮肤组织取下后立即放入10%福尔马林中固定。 　　1.3 免疫组化实验：应用链酶亲和素-生物素-酶复合物（StreptAvidin-Biotin-enzyme Complex， SABC）染色试剂盒（博士德生物工程有限公司，武汉），一抗为兔抗小鼠I、III型胶原多克隆IgG抗体（博士德生物工程有限公司，武汉），实验步骤按说明书操作。实验结果应用Motic医学数字图像分析系统对二氨基联苯胺（3，3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride， DAB）阳性染色的切片进行定量分析。400×下随机选取3个视野，分别计算小鼠真皮I、III型胶原阳性表达面积和统计场总面积的百分比，取平均值。 　　1.4 统计学处理：所测的数据以均数±标准差（±s）表示，应用SPSS15.0软件对数据进行单因素方差分析（analysis of variance， ANOVA），P 　　3 讨论 　　皮肤光老化的各种治疗方法中，非剥脱性嫩肤技术因疗效确切、副作用小等特点具有明显的优势[5-6]。正常真皮组织的细胞外基质主要有I型胶原构成，还有一小部分III型胶原、弹性蛋白、蛋白多糖和纤维粘连蛋白[7]。皮肤光老化的组织学改变主要表现为真皮胶原退行性变，排列紊乱，I型和III型胶原水平下降。 因此非损伤性激光嫩肤疗效的评价多是通过组织学水平检测真皮胶原水平的变化来实现的。 　　本研究通过免疫组化实验方法，对经连续4次激光治疗的小鼠真皮I型和III型胶原进行染色，结合计算机图像分析系统，定量地检测和比较了Q开关1064nm Nd：YAG激光和长脉宽1064nm Nd：YAG激光的疗效。通过对不同时间检测点小鼠真皮I型和III型胶原水平的动态研究发现Q开关1064nm Nd：YAG激光和长脉宽1064nm Nd：YAG激光均可引起真皮胶原重建，既可诱导I型胶原增多，