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UF—100检测脑脊液临床应用价值研究 　　[摘要] 目的 研究一种简便、快速、准确的脑脊液（CSF）常规检测方法。 方法 对128份CSF标本进行UF-100及显微镜检测，结果与生化所得结果相比较。 结果 利用UF-100和显微镜检分别测得的结果，经t检验差异无统计学意义（P 0.05），呈现很好的相关性（红细胞r = 0.989），（白细胞r = 0.980）。对细菌的计数与白细胞计数（r = 0.397）和CSF总蛋白（r = 0.333）呈现正相关（P 　　[关键词] UF-100；脑脊液；显微镜 　　[中图分类号] R742.3 [文献标识码] B [文章编号] 1673-7210（2013）06（b）-0086-03 　　UF-100是一种以流式细胞术为基础的通道式仪器，可以对各种有形成分提供自动分析，近几年被广泛地应用于临床实验室。本研究旨在探讨该仪器检测脑脊液（CSF）中红细胞（RBC）、白细胞（WBC）及细菌，其结果与显微镜计数结果、生化（蛋白质、糖）及微生物学数据（革兰染色和培养）相比较，建立一种简便、快速及准确的CSF常规检测方法，为神经系统疾病诊断提供有效数据。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　患者均来自2010～2011年沈阳军区总医院住院患者，CSF标本大多采用腰椎或脑室引流，用无菌容器收集128份，平均分成2～4份，快速送往不同的实验室（生化室、细菌室、常规室）。这些标本中86份为男性，42份为女性。其中，中枢神经系统感染47份，中枢神经系统损伤35份，肿瘤患者28份，自身免疫性疾病（如多发性硬化和肌萎缩侧索硬化）10份，痴呆和脑脊髓炎8份，经脑室排出41份，腰穿87份，标本收集后8 h内进行分析检测。仪器为日本sysmex公司生产的UF-100全自动尿沉渣分析仪，试剂为该仪器配套试剂。 　　1.2 UF-100全自动尿沉渣分析原理 　　UF-100全自动尿沉渣分析仪采用氩离子激光流式细胞仪，通过检测传导性对体液中有形成分进行分析，计数粒子数量。用前向散射光知粒子大小，用荧光染料菲啶测DNA，用染料羰氰测膜，从前向散色光和荧光的脉冲强度和宽度，结合阻抗数据，基于粒子大小、性状、数量和染色特点不同，多参数计算而将粒子进行分类，结果显示散点图及每微升的数量，对RBC、WBC、细菌进行检测和计数[1-2]。UF-100的操作方法按仪器使用说明书进行。 　　1.3 显微学分析 　　手工细胞计数方法按《全国临床检验操作规程》进行，用牛鲍计数板显微镜检，每一样品要计数10个大方格内细胞总数，单位为cell/mm3。对于WBC 5/μL的标本和被疑似中枢神经系统（CNS）肿瘤CSF标本进行WBC分类，取25～150 μL CSF（根据细胞量）用细胞离心机进行离心5 min（2500 r/min），涂片，瑞氏染色，光学显微镜检，在100×油镜下观察，若存在细胞，计数100个细胞进行分类。 　　1.4 生化检查 　　用雅培（美国）全自动生化分析仪按照仪器说明书检测CSF生化指标、总蛋白、葡萄糖。 　　1.5 微生物学检查 　　按照《全国临床检验操作规程》进行，对128份标本进行革兰染色和CSF培养。CSF标本进行离心2500 r/min，离心10 min，弃上清液，余250 μL，取15 μL涂两张片，进行常规革兰染色，在光学显微镜100×油镜下镜检。对于CSF培养，将离心后标本取15 μL接种于绵羊血平板。 　　1.6 操作及干扰因素 　　在培养出患者独立菌落中取大肠埃希菌（n = 3）和链球菌（n = 3）菌落至于5 mL生理盐水中进行分析，对于富含血小板的血浆在枸橼酸钠抗凝后2000 r/min，离心10 min（n = 3，血小板数量485×109/L）用于研究血小板对细菌计数的干扰。 　　1.7 统计学方法 　　采用SPSS for windows 16.0软件，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，进行t检验，并进行相关性分析。以P 0.05）；并呈现很好相关性（RBC r = 0.989，WBC r = 0.980），见图1、2。标本中有3例显微镜检WBC1000/mm3，WBC分类中淋巴细胞10%，而UF-100 WBC计数淋巴细胞被误划分到“其他细胞”中，导致WBC计数值偏低。在这几例中，淋巴细胞可在散点图（菲啶荧光相对前向散色光）中很容易被确认，存在于细菌和白细胞区域之间的一群散色光谱；但1例急性淋巴细胞白血病合并脑转移的原淋细胞被正确认为WBC。 　　2.2 细菌 　　UF-100细菌计数与血培养，革兰染色结果相比较差异无统计学意义（P 0.05）；UF-100细菌对数换算结果与WBC计数、总蛋白和葡萄糖做散点图。由图3～5散点