乌司他丁和血必净抑制早期内毒素血症大鼠炎症反应对比研究.docVIP

乌司他丁和血必净抑制早期内毒素血症大鼠炎症反应对比研究 　　[摘要] 目的 研究乌司他丁（ulinastatin，UTI）抑制早期内毒素（LPS）血症大鼠的炎症反应是否优于血必净（Xuebijing，XBJ）。 方法 通过鼠尾静脉注射LPS复制LPS血症大鼠模型。54只SD大鼠随机分为LPS组、（LPS+UTI）组、（LPS+XBJ）组，每组18只，分别在用药后8 h、24 h、48 h时点随机快速处死6只大鼠，取心脏血分离血清，用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。 结果 三组中各时间点TNF-α、IL-6、IL-1分别比较差异均有统计学意义（P 0.05）。 结论 UTI和XBJ均能有效抑制LPS大鼠的炎症反应；UTI在炎症早期抑制炎症反应优于XBJ。 　　[关键词] 乌司他丁；血必净；炎症反应；白细胞介素-1；白细胞介素-6；肿瘤坏死因子-α 　　[中图分类号] R459.7 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）23-0001-02 　　革兰阴性菌（G-）是最常见的致病菌，内毒素（LPS）是G-菌感染的主要致病因子， 在微生物感染的早期就开始发挥作用。LPS通过受体结合后，触发机体产生一系列炎症级联反应，在炎症早期就释放大量早期炎症介质如TNF-α、IL-1β等，故抑制炎症因子的释放有重要的作用，目前大量研究表明乌司他丁（UTI）和血必净（XBJ）均具有抑制炎症反应作用，本研究通过检测早期炎症因子TNF-α、 IL-1及IL-6，从而探讨UTI抑制LPS血症大鼠的炎症反应效果是否优于XBJ，旨在为临床治疗LPS血症选药提供理论支持。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　成年SPF级雄性SD大鼠54只，体重220～250 g，周龄8～10周，随机分为LPS组、UTI治疗组和XBJ治疗组，每组18只，大鼠由广东省医学实验动物中心提供。 　　1.2 主要试剂 　　LPS（美国，Sigma公司）；XBJ（天津红日药业股份有限公司，批；UTI （广东天普生化医药股份有限公司，批； IL-1、IL-6、TNF-α（美国，Biosource公司）。 　　1.3 方法 　　使用LPS（5 mg/kg，用NS稀释至1 mL）鼠尾静脉注射建立LPS血症大鼠模型[1]。分别用NS（2 mL）、TUI（20 000 U/kg，NS稀释至2 mL）[2]、XBJ（4mL/kg，NS稀释至2 mL）[3]腹腔注射相应组别的大鼠，每天2次，观察大鼠用药后活动、进食、???毛、眼球凹陷、呼吸抑制等反应，每组分别在用药后8 h、24 h、48 h时点随机取6只大鼠并行乙醚吸入麻醉后处死大鼠，取心脏血，分离血清，测定IL-1、IL-6、TNF-α的值，并记录大鼠死亡情况。 　　1.4 统计学分析 　　2 结果 　　2.1 各组大鼠一般观察指标 　　NS对照组大鼠，正常活动及进食；LPS组大鼠注射LPS后8 h精神萎靡，坚毛，不进食，活动减少，体温升高，呼吸急促，对刺激反应差；12 h后，呈嗜睡状态，倦怠，卷曲，活动明显减少，多数出现解稀便，至24 h达到高峰；48 h后渐恢复活动，少许进食水。（LPS+UTI）组和（LPS+XBJ）组大鼠注射LPS后的一般情况和高峰与LPS组相似，但程度较轻，24 h后活动及进食惭恢复，但是（LPS+UTI）组比（LPS+XBJ）组明显。 　　2.2 TNF-α、IL-6、IL-1水平比较 　　（LPS+UTI）组、（LPS+XBJ）组及LPS组在不同时段的TNF-α、IL-6、IL-1水平比较，差异有统计学意义（P 0.05），提示UTI在早期治疗比XBJ效果好。见表1～3。 　　3 讨论 　　TNF-α在白细胞介素的合成、增强炎症反应等具有启动、触发作用[4]，经UTI干预后的缺血心肌大鼠动物模型的心肌TNF-α的表达明显减少[5]。UTI还能降低重症急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6的水平[6]。LPS可上调IL-6的表达，UTI可抑制LPS所致的IL-6过度表达[7]，还可降低泌尿系脓毒性休克患者血清IL-6水平，改善泌尿系脓毒性休克的病情[8]。UTI使鼠爆发性肝衰竭模型动物的TNF-α等促炎因子的分泌减少，从而大鼠的肝脏损伤减轻[9]。UTI可减轻ALI过程中炎症介质对内皮细胞骨架的影响，改善内皮细胞的通透性[1]，对LPS所致新生大鼠急性肺损伤也有保护作用，可能是通过抑制肺组织MMP-2的表达水平实现的，且抑制作用呈剂量依赖性[10]，其机制可能通过调节凋亡相关调控基因Bcl-2和Bax的不同表达发挥作用[