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副波长选择对免疫抑制法测定肌酸激酶同工酶活性影响 　　[摘要] 目的 探讨副波长选择对西门子ADVIA 2400全自动生化分析仪免疫抑制法测定肌酸激酶同工酶（CK-MB）的影响。 方法 选择不同副波长对溶血、黄疸、脂血等干扰样本和正常对照血清样本进行测定。 结果 副波长宽度的选择对外观正常对照样本血清影响差异无统计学意义（P 0.05）。以405 nm、480 nm、450 nm、505 nm为副波长的双波长法检测血红蛋白、胆红素、乳糜血等干扰样本，干扰样本与对照间差异有统计学意义（P 　　[关键词] 副波长；CK-MB；血红蛋白；胆红素；乳糜血 　　[中图分类号] R446.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）18-0108-02 　　肌酸激酶（Creatine Kinase，CK） 是人体能量代谢过程中的重要酶类，由肌肉（M）型和脑（B）型两种单体亚单位组成，包括CK-MB、CK-MM和CK-BB三种同工酶，其中CK-MB对于诊断急性心肌梗死有重要作用，是应用最广泛的心肌损伤指标之一[1]。目前酶法测定CK-MB活性最常用的是免疫抑制法，研究发现轻微溶血、胆红素、乳糜血对测定结果影响较小，但中度及重度溶血、胆红素、乳糜血会严重影响测定结果.副波长的选择可以消除部分干扰。干扰物对某些生化指标的影响已有文献报道，但不同副波长选择对免疫抑制法测定CK-MB抗干扰的研究较少，本文就副波长的选择测定CK-MB的影响作一些探讨。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　ADVIA 2400全自动生化分析仪购于德国西门子公司；免疫抑制法CK-MB试剂盒购于宁波美康生物科技股份有限公司，批号游离胆红素及结合胆红素购于百灵威科技有限公司，批号分别为LK50L19和JH10-4286；血红蛋白购于上海瑞齐生物科技有限公司，批号中/长链脂肪乳注射液（C6-C24）购于华瑞制药有限公司，批号：80DH066。 　　1.2 检测方法 　　收集本院生化室2012年2月份外观正常体检标本50份，应用免疫抑制法检测CK-MB活性，所有测定严格按试剂盒说明书进行操作。测试条件如下：温度：37 ℃；比色杯光径为1.0 cm；检测主波长340 nm；样品（校准管以校准品做样品）加R1混匀，37℃孵育5 min后加入R2混匀，37℃孵育2 min，连续监测1～3 min吸光度变化，计算每分钟的吸光度变???，其中样本用量10 μL，试剂1用量200 μL，试剂2用量50 μL。选择好仪器测试程序后，将副波长依次设为无、405、450、480、505、546、570、600、660、700、750 nm，其他参数不变，取正常血清50份测其CK-MB，然后分别制备溶血（游离血红蛋白浓度400 mg/L以上）、脂血（总胆固醇浓度4.8 mmol/L）和黄疸（总胆红素浓度50 mmol/L）干扰标本，选择不同的副波长测定CK-MB活性。 　　1.3 统计学方法 　　采用SPSS 16.0统计软件进行统计学处理。正态分布的计量资料以（x±s）表示，两组间均数比较采用两独立样本t检验，多组间样本均值间差异采用单因素方差分析，P 　　本文采用“配对差异”实验对不同副波长下CK-MB抗干扰能力进行考察，此法通过把一个潜在的干扰物质添加到样本中，评价其相对于未加干扰物的对照样本的偏差来判断该物质是不是干扰物质。由于是人为加入干扰物，因此存在一些局限性：如添加化合物的特性可能不同于那些在体内自然循环状态下的化合物；实验样本基质并不代表典型的有问题的临床样本；样本中真实的干扰物可能不是原来的药物，而是代谢产物；试验浓度水平可能选择太低或太高以致不真实等[7-11]。但此法也是目前临床应用最广泛的干扰评价试验，有其独特的优点，如可以提高效率，提供更多的信息，与一次一个检测相比需要的分析物较少，干扰物质之间及干扰物与分析物之间的相互作用都能够被评价等[12]。 　　综上所述，本文采用“配对差异”干扰评价试验，为正确的设置测试参数以避免临床应用中胆红素及血红蛋白对免疫抑制法CK-MB测定干扰提供了依据。根据本文结果，免疫抑制法CK-MB检测应避免340/405 nm、340/450 nm、340/480 nm、340/505 nm组合的双波长法测试程序。 　　[参考文献] 　　[1] Stein PD，Janjua M，Matta F，et al. Prognosis based on creatine kinase isoenzyme MB， cardiac troponin I，and right ventricular size in stable patients w