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2018届高三生物(浙江选考)一轮复习文档 选考章末检测卷12 第十二章 生物技术实践 Word版含答案
选考章末检测卷(十二)第十二章 生物技
1.(2016·10月浙江选考节选)(一)请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题:(1)配制LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl加入一定量的蒸馏水溶解再加入________灭菌备用。(2)配制尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用________灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤因为G6玻璃砂漏斗______________故用于过滤除菌。然后将尿素溶液加入已经灭菌的含有酚红的培养基中备用。(3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上培养48 h推测固体培养基上生长的菌落数最少的是________(A.10-5稀释液+尿素固体培养基 B.10-5稀释液+LB固体培养基 C.10-4稀释液+尿素固体培养基 D.10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现________其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生________。(4)制备固定化脲酶时用石英砂吸附脲酶装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱其作用是________________________________________________。【解析】 (1)LB固体培养基的成分组成是:蛋白胨、酵母提2)尿素固体培养基的制备:先将含有酚红的固体培养基高压蒸汽灭菌待冷却至60 ℃时加入灭菌的尿素溶液但要注意尿素溶液的加入需用到高压蒸汽灭菌的G6玻璃漏斗过滤用其过滤的原因是孔径小、细菌不能通过便于除菌。(3)LB固体培养基含有的营养元素全面培养基上会有较多菌落而尿素培养基只以尿素为唯一氮源培养基上有较少菌落。尿素培养基上细菌产生的脲酶将尿素分解为NH使菌落周围的含酚红的培养基变成红色环。(4)制备固定化脲酶可用吸附法将脲酶固定在石英砂上用10倍体【答案】 (1)琼脂 (2)高压蒸汽 孔径小细菌不能滤过(3)A 红色环 氨(或NH)
(4)除去游离的脲酶2.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程请回答下列问题:→→→→
(1)A过程配制的是通用细菌培养基称为________培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外还要加入一定量的氯化钠以维持__________________。对培养基酸碱度的调节应该在B过程的________(填“前面”或“后面”)进行。(2)与C过程相比过程培养基中增加的物质是________。E过程所需的温度是________。(3)D过程后一个菌体便会形成一个____________________________的通用方法也是筛选特定菌株的最简便方法之一。(4)植物组织培养时先配制MS培养基再加入一定比例的植物激素当生长素相对较多时可促进________。(5)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是________。接种环和镊子三角瓶和广口瓶发芽培养基和生根培养基用于培养的幼茎和幼芽【解析】 (1)LB液体培养基是通LB固体平面培养基则用于划线分离培养基中加入氯化钠的作用是维持培养基的渗透压培养基需调整好酸碱度后才能进行灭菌若灭菌后再进行酸碱度调整又会产生新的污染。(2)在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂就成了固体培养基培养好后的菌种应置于4 ℃冰箱中保存。(3)通过划线分离可使一个菌体繁殖出一个菌落。(4)植物组织培养中若生长素多有助于生根;若细胞分裂素多则利于生芽。(5)高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等的灭菌而用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何的灭菌操作否则会导致细胞死亡【答案】 (1)LB 培养基的渗透压 前面(2)琼脂 4 ℃(3)(单)菌落 消除污染杂菌(纯化菌种)(4)生根(5)D
3.下图是利用土壤中L微生物提取脲酶并进行纯化和固定化的实验流程。请回答下列问题:→→→
(1)筛选微生物L时用________作为培养基中的唯一氮源加入________作凝固剂。接种时应采用________(方法)。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________。高压蒸汽灭菌紫外灯照射用70%的酒精浸泡过滤(3)对微生物L进行扩大培养时宜采用________培养基并采用________方法对接种环进行灭菌。(4)脲酶宜采用共价偶联法进行固定化可通过检测固定化脲酶的________来确定其应用价值。除此法外酶的固定化方法还包括________、________及交联法等。【解析】 (1)微生物L能产生脲酶脲酶能分解尿素因此微生物L能利用尿素作为其生长的氮源所以筛选微生物L时须用尿素作为培养基中的唯一氮源由于琼脂是未被提纯的混合物其内含一定量的含氮化合物所以要用经纯化的琼脂糖作为凝固剂。利用涂布分离法更易形成单菌落故纯化微生物L应采用涂布分离法。(2)由于尿素加热会
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