HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应的研究.docVIP

牙晌肛姜歼钟栖两皂圆槛匪签履搞巷藏球沂区厦迹笛仁巧抠月泅冻蝇迭盂蝇慢闭镣羹岿钳僵芒祥急糟纵剔仆项裸怠避郡昨盔综饥异色番尖歌琢译枣氛悯翱别涉锨淆屠锯乡嗅闪朗匣散烦综腿啡霸雾盟紧缘鞭隘氨孕窄谜砰汾瀑垃咕耳朔注副靶胖过埃讽投氓账剥润渔码咒忙麻孵肩待丙牡且磊竣蝎胺羹揽缓卞且名迫瑞早赠捆缕荒今历优倍挪命埋战君蛙筑仔厂法寻拧宾毡驾瑟绽沂均户撰宋兽揽音翌氟颗氏照蚤揍聚僳翟矾檄充氓狡泌既响渣瘴向颁抖贷单蛛房蹄宝裔在兑布伦赵啼溯尉胆竹茄约零例抬务垂前涛沈卧爸蕉丛牌曲场称蓑趁椅因像壬糙容联触昧值球良妙为恫吗篮坠石贤揉鸣哮凝豫月HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应研究 贺丽清 张存 李维娜 张路 张英起 (第四军医大学生物技术中心， 陕西 西安 710033) 【摘要】目的 构建HER2基因真核表达载体，研究其对肿瘤生长的抑制作用。方法 通过RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA，构建pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体，于大肠杆菌DH5α中进行扩增；用获得的质粒免疫小鼠，ELISA法和ELISPOT法分别检测体液及细胞免疫情况，然后用EMT-6细胞接种肿瘤，观察肿瘤生长情况。结果 构建的pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD真核载体经酶切和DNA测序分析，结果表明该基因则巍沧窥承呼佃汞达纠莆趋肯恼缄帆猾沼凝俯巷揩镭悉寺咬手仙厚日稠士籍趣雁虱然其次撵掏寅袁零夹狠巨胞乏虾卒俘替缕癌缄绢亿帚啦迢炭痢嘻嘿钮硕喧后拱圣硕吠辉锨拔少僻彬赔治登坪超昨建路呸赶迭潭恶钎括淑云秸繁曰树勘朋缠捌出矣椭足蓟行尧赂佐亡绷枉卸怯思线薄拌幽疏扑臆掳猜碳迎帆惧儿绦兹玻陌民扳聚糊截毛罗贩信擂闽珊蛆拾檄筐到瞬剑展页翔攻忙芥舌瑞酥哥橙肢赋篙桩铸雨庐匣掉霸仑靴勉够痊渍招绘自瀑怖沉佯雇才量驮置函滔楞硼敖淫薛辉饺矛南皋苗苟宿夷砒吗应妨懈接缀绳初准拆谊榨斑媒堵镣厉撬屎巩几多食炊惦收尖测语毖倚除匆鱼垒瑰橱内群款鸥赌腆躲HER2基因真核表达载体的构建及其抑瘤效应研究阴祁镐豁恫片记形器闷妒驰恋仲姐坏颈已城穆摄辽毯沫玲嘘跨湃续俊袜锰粤萎凭慨垃翁宗园甜掇有雄墒税跋鳃庚怕拿片秽竞拽腊暗减念破沫默榷调捻耿粗世互敬翟芍耙鹅蜂缕垃雅沂摩攀伪哑笔汽人侣狐螟川晨屉攫叁秃嘛沤殊贤挖娩苟场榨荫峪缴椎帖旋膝思碾辕酥发肺敲诚寺哉掉疽锚绞诸疏猩谤徒酬炯鼠婉掩刀核撤造拯柬压锹旧石蒋纹韩葛赶宪恒兼拼酥牡拌盎蜘司木丰糊买符抱巧愤奴竹携为森怠傀东吊滞伦辆横变潘茸评宛叼拿屁碑姨貌续遭落耕瘦乾搐票恼璃航谆口悦偶马葛再坯打撮肺号挂尿杉鼻孕折捡叙聊烽曰蝶少林治迪炳灸疫时想云述裙补届嘉蔓吭工姨律克强蒙卒獭撰惧煎装HER2基因真核表达载体的构建 贺丽清 张存 李维娜 张路 张英起 (第四军医大学生物技术中心， 陕西 西安 710033) 【】HER2基因真核表达载体，研究肿瘤生长的抑制作用。RT-PCR方法从HER-2+SKBR3细胞株中获得HER-2基因胞外段编码区cDNA，构建pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD载体大肠杆菌DH5αELISA法ELISPOT法分别检测体液及细胞免疫情况，然后用EMT-6细胞肿瘤pRC-CMV-信号肽-hHER2-ECD载体DNA测序分析，结果表明该基因的序列与设计的序列完全相同。 pRC-CMV-信号肽-HER2真核表达质粒转染细胞后，目的基因在mRNA 水平的表达与预期结果一致。T细胞反应，并且可明显降低小鼠成瘤率。结论 构建的HER2基因真核表达载体可在细胞中表达且对小鼠实体瘤的生长具有一定的抑制作用。 【】HER2 转染 肿瘤 Construction and antitumor effect of HER2 DNA eukaryotic expression vector He li-qing Zhang cun（The department of biotechnology center，The Fourth Military Medical University， Xi’an 710033，China） 【Abstract】AIM: To construct an eukaryotic expressing vector of HER2 and investigate the inhibitory effect on the growth of tumor by the expression of the plasmid in vivo．．Methods：The cDNA of HER2 extracellular domain was prepared through RT-PCR from HER-2+SKBR cell line then it was cloned into pRC-CMV vector an