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实验四 正常与麻醉小鼠缺氧耐受性的变化
【目的和内容】
急性缺氧预适应对小鼠缺氧耐受性的影响实验表明,小鼠在急性重复密闭缺氧条件下,对每次重复缺氧的耐受时间逐次递增。
已知麻醉、镇静药物如地西泮(安定)、利多卡因及戊巴比妥钠等可保护神经细胞免遭缺氧的损害,延长小鼠在缺氧状态下的生存时间。
本实验将观察麻醉对小鼠重复缺氧耐受性递增的影响。观察正常小鼠在急性重复缺氧中的表现及其缺氧耐受时间的变化。比较麻醉、兴奋鼠及正常鼠,在急性重复缺氧中表现的异同。;【材料和用具】
昆明小鼠、天平、已经标定的容积约为
125ml的广口瓶3只,注射器2支,1%的戊巴比
妥钠溶液,生理盐水,秒表。;【操作】
一、标定广口瓶容积:将广口瓶中注满水,然后把水倒入量筒内。如此测量3次,取均值为该瓶的容积(原始瓶容积),在瓶和瓶塞上分别注明同一编号。;二、动物分组
昆明种小鼠6只,随即分为3组(Ⅰ Ⅱ Ⅲ) ,每
组2只。
组Ⅰ:对照组 不注射生理盐水和戊巴比妥钠溶液。
组Ⅱ:生理盐水组 按5.5ml/kg的剂量给小鼠腹腔
注射生理盐水,3min后进行实验。
组Ⅲ:戊巴比妥钠组 按5.5ml/kg的剂量给小鼠腹
腔注射1%的戊巴比妥钠,3min后进行实验。
动物称重 药物注射; 三、进行重复缺氧:分别将三组小鼠,置于
经过标定的广口瓶内,以凡士林涂抹瓶口密闭、
计时,此为起始时间。观察小鼠的状态,一但出
现翻正反射消失、痉挛样动作和喘呼吸,立即取
出,并随即转移到第二只经过标定的、含有新鲜
空气的广口瓶内,密闭、计时,开始第二次缺
氧;共进行三次缺氧实验。; 四、计算并比较缺氧耐受时间:各次换瓶中,从密
闭开始到喘呼吸出现的时间为“原始耐受时间”。按下述
公式换算成100ml有效空气中的“标准耐受时间”,并据
以比较各次的缺氧耐受水平。
T=T0×l00/Ve
=(t1-t0)×l00/(V0-Va)
=(t1-t0)×l00/(V0-Wa/Da)
=(t1-t0)×l00/(V0-Wa/0.94)
式中,T为标准耐受时间(min);T0为原始耐受时间
(min);t0为密闭开??时间;t1为喘呼吸出现时间;V0为
原始瓶容积; Ve为有效瓶容积; Va为动物体积; Wa
为动物体重; Da为动物比重。
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