外植体的来源.PPT

影响植物快繁的因素 植物快繁的目的是以尽可能高的效率生产试管苗，获得最大的经济效益。因此，在快繁时应使各种影响因素处于最适合快繁的状态。 主要影响因素： 外植体 培养基 培养条件 继代培养 移栽 一、外植体： 外植体的来源：最适的为茎尖、带芽茎段，也可以利用叶片、子叶、根段、花器官组织等。 外植体生理年龄：幼嫩组织分化能力更强。 外植体大小：不能太小，否则影响成活率。除非是用于脱毒苗的生产。 二、培养基： 基本培养基：MS培养基应用最为广泛。对于某些植物及生根阶段，以1/4或1/2MS较好。蔗糖和葡萄糖浓度为2-4%。生根时稍低。 植物生长调节剂：主要以细胞分裂素和生长素的配合使用，调节外植体的生长和分化。另外ABA、GA、CCC等也具有不同的作用。 培养基的物理特性：以固体培养较为普遍，也有采用液体培养，如兰花原球茎的增殖。 三、培养条件： 光照：1000-3000lx，阶段Ⅲ可增强。14-16h/天。 温度：与植物的原产地相应。一般为25±2℃。有时可进行高温或低温的预处理。 湿度：要求环境相对湿度不能太低，一般在70-80%。 气体：要求培养基及培养瓶通气良好，同时及时转接。液体培养要求振荡培养，促进氧化交换。 四、继代培养： 主要指对形成的芽丛、胚状体或原球茎等进行转接继代。继代间隔时间一般为20天左右。 五、移栽： 根系结构不完善的试管苗移栽后不易存活。要求根系结构完整，具根毛，再生根的吸收能力强。 叶表皮组织不发达的试管苗也不易移栽存活。移栽要求打开瓶口驯化2-3天；或在瓶内添加一些生长延缓剂如PP333、CCC等培育壮苗。 * 一、概念和意义 器官培养 第二节 茎尖的培养 分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。 茎尖分生组织培养主要是指对茎尖长度不超过0.lmm的茎尖进行培养，这种培养可获得无病毒植株。 普通茎尖培养是指对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。 茎尖培养的概念和意义 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 微繁技术的概念： 通过茎尖培养进行植物的快速无性繁殖在一些植物中已经成为一门成熟的技术而被应用。由于这一技术是在无菌条件下，且又是在一个非常小的范围内来大量进行繁殖的。因而，人们又把这种繁殖技术称之为微繁技术 普通茎尖培养与繁殖技术 器官培养 第二节 茎尖的培养 茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段: ① 无菌培养的建立。 ② 芽的增殖。 ③ 中间繁殖体的增殖。 ④ 诱导生根。 ⑤ 试管苗的移栽。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 1．无菌培养的建立 (1) 外植体的制备 供试母株应生长旺盛、枝条健壮、无病。 应先将材料进行消毒。由于植物的种类及材料的来源不同，可采取不同的消毒方法。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 首先对材料进行流水清洗，干净后迅速加入75％的酒精中漂洗几秒到十几秒钟；然后用0.1%的升汞或20倍的次氯酸钠液消毒。对于嫩茎的茎尖，消毒时间宜短（5～8min即可）。对于来自较老枝条上的顶尖和侧芽及有芽鳞片保护的芽消毒时间可长达8～12min。也可以在用75％酒精消毒后，用两种消毒剂连续消毒。消毒后的材料用无菌水洗3次，后置于无菌条件下进行常规剥离。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 除茎尖组织外，一些植物的茎切段和一些鳞茎植物的鳞茎切块、块茎、球茎等还可以通过培养产生不定芽而进行繁殖。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 （2）培养基 目前用于快速繁殖的基本培养基很多。常用的有MS、B5、 White培养基等。木本植物多用B5培养基。 糖浓度，一般为 2％～3％，固化剂选用琼脂。 天然有机物：椰子汁有利于兰花的增殖。麦芽汁有利于柑橘属的分化，水解乳蛋白或水解酪蛋白则有助于许多植物不定芽和不定胚的分化。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 生长调节剂： 生长素：用的最多的是NAA，其次是IAA。 细胞分裂素：如 6-BA、KT和玉米素，细胞分裂素在促进不定芽产生上效果显著。 赤霉素：往往有利于茎尖的伸长和成活，需要的浓度较低，一般为0.lmg／L，浓度太高会产生不利影响。 二、茎尖培养的一般方法 器官培养 第二节 茎尖的培养 （3）培养条件 光：光照度在 1000～3 000lx，光周期实行连续16h光照、8h黑暗。在微繁培养中光照不