食品中维生素B2的测定 征求意见稿.docVIP

前 言 GB/T 5009.85-2003 《食品中核黄素的测定》、GB/T 9695.28-2008 《肉与肉制品 维生素B2含量测定》、GB/T 7629-2008 《谷物中维生素B2测定》、GB 5413.12-2010 《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B2的测定》。 本标准与GB/T 5009.85-2003、GB/T 9695.28-2008、GB/T 7629-2008、GB 5413.12-2010相比，主要变化如下： ——标准名称修改为“食品中维生素B2的测定”； ——混合酶液中删除了酸性磷酸酶，并明确使用木瓜蛋白酶和高峰氏淀粉酶； ——增加了——删除了食品安全国家标准 食品中维生素B2的测定 范围 本标准规定了食品中维生素B2的本标准适用于的测定。 除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的级水。HCl）。 3.1.2 冰乙酸（CH3COOH）。 3.1.3 氢氧化钠（NaOH）。 3.1.4 三水乙酸钠（CH3COONa2·3H2O）。 3.1.5 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 3.1.6 木瓜蛋白酶：活力单位10 U/mg。 3.1.7 Taka-淀粉酶：活力单位100 U/mg。 3.1.8 甲苯（CH3C6H5）（0. mol/L）：准确称取0 g三水乙酸钠，加900 mL水溶解，用水定容至1000 mL。（0.05 mol/L）：准确称取6.80 g三水乙酸钠，加900 mL水溶解，用冰乙酸调pH值至4.0-5.0，用水定容至1000 mL。维生素B2（C17H20N4O6）标准品：纯度≥9%。（ μg/mL）：，用定容至10 mL。 3.4.2 维生素 μg/mL）：准确吸取2.00mL维生素B2标准储备液，用水稀释并定容至100 mL。在4℃冰箱中避光贮存，保存期一周。 3.4.3 维生素B2B2标准中间液25 μL、50 μL、100 μL、250 μL、500 μL，用水定容至1 mL，该标准系列浓度分别为0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL。临用前配制。 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪，带有荧光检测器。 4.2 天平：感量1 mg和0.01 mgpH计精度0.01混合器。。。 。 500 g，用组织捣碎机充分打匀均质，分装入洁净棕色磨口瓶中，密封，并做好标记，避光存放备用。 称取2 g～ g（精确至0.01 g）均质后的试样（试样中维生素B2的含量大于5 μg）于100 mL具塞锥形瓶中，加入60 mL盐酸溶液，充分摇匀，塞好瓶塞。将锥形瓶放入高压灭菌锅内，在121 ℃下保持30 min，冷却至室温后取出。用氢氧化钠溶液调pH至6.0—6.5，加入2 mL混合酶溶液，摇匀后，置于37 ℃恒温水浴锅中过夜酶解。将酶解液转移至100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，用滤纸过滤或离心，取滤液或上清液，过0.22 μm水相滤膜作为待测液。 注：操作过程应避免强光照射。 5.2 仪器参考条件 5.2.1 色谱柱：C18，10 mm × 4.6 mm， μm，或等效 mL/min。 0 ?C。 462nm，发射波长522 nm。 ： μL。 5.3 标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入仪中，测定相应的，以标准工作液的浓度为横坐标以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。试样溶液的测定 将试样溶液注入仪中，得到，根据标准曲线得到待测液中的浓度平行测定次数不少于两次。 试样中维生素B2的含量按公式1）计算： ……………………………………（1） 式中： —— 试样中的含量，单位为（）； —— 标准工作液中的μg/mL）； —— 试样测定液中的峰面积； —— 试样； —— 标准工作液中的峰面积； —— 试样质量，单位为（）。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字（或小数点后位）。 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的%。 方法检出限为，定量限为。 除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的级水。HCl）。 10.1.2 冰乙酸（CH3COOH）。 10.1.3 氢氧化钠（NaOH）。 10.1.4 三水乙酸钠（CH3COONa2·3H2O）。 10.1.5 木瓜蛋白酶：活力单位10 U/mg。 10.1.6 Taka-淀粉酶：活力单位100 U/mg。 10.1.7 硅镁吸附剂：60目～CH3COCH3）。 10.1.9 高锰酸钾（KMnO4）。 10.1.10 过氧化氢（H2O2）：30%。 10.1.11 连二亚硫酸钠（Na2S2O4）。 10.1.