高效液相色谱质谱联用技术原理与应用课件.ppt

高效液相色谱-质谱联用技术原理与应用 什么是液质联用(LC/MS) LC: 液湘色谱仪 一种能够把液体混合物中的不同组分根据在色谱柱中保留时间不同进行分离,检测及收集的仪器 MS: Mass Spectrometer 质谱仪 一种能够把分子转化生成带电离子,并在气态中根据质荷比(m/z : m质量 z分子所带电荷数 )的不同把离子进行分离并进行检测的仪器. 质谱技术： 质谱分析过程：样品通过进样系统进入离子源，由于结构性质不同而电离为各种不同质荷比（m/z）的分子离子和碎片离子，而后，带有样品信息的离子碎片被加速进入质量分析器，不同的离子在质量分析器中被分离并按质荷比大小依次抵达检测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质量谱，也就是质谱 (mass spectrum)。 质谱：按离子的质荷比的大小依次排列形成的图谱 质谱分析系统的基本组成 真空系统 1 电子轰击电离(EI) GC/MS 2 化学电离(CI) GC/MS 3 大气压化学电离(APCI) LC/MS 4 快原子/离子轰击(FAB/SIMS )离子源 5 等离子体解吸(PD) 6 基质辅助激光解吸电离(MALDI) 7 电喷雾电离(ESI) LC/MS 8 场致电离 -- Field ionization 9 火花放电 -- Spark source 10 激光电离 -- Laser ionization (LIMS) 11 共振电离—Resonance ionization(RIMS) 12 热电离 -- Thermal ionization (TIMS) Turbo VTM 离子源 电喷雾(ESI)离子源工作原理 离子源的选择---ESI 优点 适合范围广:分析离子型/极性化合物、难挥发或热不稳定性化合物 多电荷离子的形成，可以分析高分子量化合物 灵敏度高 离子源的选择--- APCI 优点 有一定挥发性的中等极性或低极性的小分子化合物 对溶剂选择、流速和添加物的依赖性较小 离子源 离子簇在离子通道的运动模式 电压使离子簇以螺旋运动的方式前进 离子肼的工作原理 应用 制药：合成过程中中间体、成品的结构鉴定，杂质分析 天然药物与中药分析：结构鉴定，质谱规律，中药药效物质基础 药物代谢药物动力学：药动学 药物代谢物寻找 代谢组学 蛋白组学（生物大分子分析） 烟草 食品分析 公安毒物检查 体育兴奋剂检测 中药中非法添加化学药 新生儿筛查 制药行业 合成过程中中间体、成品的结构初步鉴定 杂质分析 液质联用分析美伐他汀的有关物质 天然产物与中药分析 蟾酥药材HPLC/DAD/APCI- MS/MS 定性定量分析方法 从蟾酥药材中共鉴定了35 个蟾毒内酯类成分, 其中4 个成分为首次发现。 通过进一步实验, 分别对17 个蟾毒内酯类化合物进行多极质谱(MSn , n=2- 4) 裂解方式研究, 根据化学结构和裂解规律将蟾毒内酯类化合物分为5 类。 蟾酥药材中8 个主要蟾毒内酯类成分进行了定量分析。 不仅可以快速、灵敏地分析蟾毒内酯类成分, 还能够对蟾酥药材及相关制剂进行有效的质量控制。 Zorbax SB-C18色谱柱＆保护柱 流动相：(A)乙腈-(B)0.3%醋酸水溶液 0-20 min ：A 25%-30%，B 75%-70% 20-37 min：A 30％-50％，B 70％-50％ 37-45 min：A 80%，B 20% 流速：1.0 ml·min-1 检测波长：275 nm 全波长扫描范围：190-400 nm 柱温：40℃ ESI源 负离子检测 扫描范围：80-1000 m/z 鞘气流：50 arb 辅助气流：15 arb 源电压：5.00 kV 毛细管温度：350℃ 毛细管电压：-12.00 V 管透镜补偿电压：-10.00 V 中药制剂中掺入西药成分分析 液质联用分析中药降糖制剂中掺入的西药成分 药物代谢与药物动力学 中药药效物质基础与配方原则研究 公安、司法鉴定 LC-MS/MS技术在法庭科学中的应用 毒品/滥用药物：可卡因、海洛因、吗啡、摇头丸、迷幻药等等 2001年1-6月缴获海洛因6201千克、鸦片1927千克、冰毒2970千克、摇头丸64万粒、度冷丁1400支、咖啡因80千克、罂粟壳40吨、易制毒化学品72吨 毒物：鼠药、农药、工业毒物、药物毒物、蛇／蝎／蜂毒、河豚毒素及其它海洋生物毒素、植物毒素等等 爆炸物：硝化甘油、OCTOGEN、HMX、EGDN、HEXOGEN、RDX、NG、TETRYL、DNT和PETN等等 其它化合物：案发现场遗物如油漆、血迹、高聚物等 质谱在生物大分子