实验十 酶的异性激动剂及抑制剂.pptVIP

酶的特异性、激动剂及抑制剂 【实验目的】 加深理解酶的特异性、激动剂和抑制剂的概念和作用特点 【实验原理】特异性：酶对其作用物质有严格的  选择性。 影响酶作用的因素很多抑制剂：能降低酶活性的物质激动剂：能增强酶活性的物质 本实验以唾液淀粉酶为例，于淀粉液和蔗糖液中，各加唾液并保温，检查它们是否被水解证明该酶的特异性 另外使各管淀粉和唾液浓度以及温度，作用时间等条件皆相同，只是分别加有氯化钠或铜盐的管和未加者对比观察结果，判定它们对酶活性有何影响。 检查淀粉被水解情况，可利用碘反应。淀粉呈兰色，水解产物大分子糊精（紫色糊精） 呈紫色 ；其次的糊精（红色糊精）呈红色；至于小分子糊精（无色湖精）及麦芽精 则为无色。 所以，碘反应的色调可反应出淀粉被水解的程度，也表明酶活性的大小。 也可用还原反应，因淀粉和蔗糖皆无还原性，而水解产物葡萄糖有还原性。 【实验操作】（1）采唾液：嗽口后，用干净容器采取自然分泌的唾液0．5～lml加H2O稀释10倍，混匀。必要时用脱脂棉过滤。 2）取中试管5支，标记管号，分别加液 （3）各加稀释的唾液 0.5ml，充分混匀。（4）立即用乳头吸管由第1管取出1滴放在点滴盘凹内（或白瓷板上），加稀碘液1滴，混匀观察其所呈色调。 以后每隔一定时间（隔2分钟或数分钟）再重取出1滴做碘反应。 连续观察了解管内淀粉水解情况，到已成红色时，向 2--5各加稀碘液 l～2滴，混匀，记录各管色调。 （5）向2～5管各加班氏试剂2ml混匀，放沸水治中煮约5分钟，取出观察结果。（6）以3~5管分别与2管结果进行对比分析，作出总结。 【附注】（1）唾液淀粉酶属于α型淀粉酶，最适pH6.9,氯离子有激活作用。（2）本实验中设置了相同的1、2两管做为对照管。第1管为了用于随时取出做碘反应以了解淀粉水解进行情况。掌握此管达到尚有红色糊精存在的程度，同时向2—5管加碘，便于对此判定结果。 （3）唾液含酶浓度生理变动较大，实验中水解作用的时间间隔要根据具体情况灵活掌握。如反应速度较快，要抓紧时机，间隔要小。如果反映缓慢，则需要时间稍长些，或者同时把各管放在37℃-40℃水浴中，以加快反应过程。。 * * 1%蔗糖1ml + H2O5滴 5 1%淀粉1ml + 0.2% CuSO45滴 4 1%淀粉1ml + 1%NaCl5滴 3 1%淀粉1ml + H2O5滴 2 1%淀粉1ml + H2O5滴 1 内容 管号