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沙枣多糖提取、分离纯化研究概述
沙枣多糖提取、分离纯化研究概述
【摘 要】天然植物多糖是由十个以上的单糖通过苷键连接而成的聚合物,它们除了作为植物的贮藏养料和骨架成分外,还具有免疫调节,抗肿瘤、抗衰老、降血糖、抗凝血等作用,且对机体的毒副作用小。现针对沙枣多糖的提取,分离纯化,生物活性及复合多糖的研究进展进行综述,为其未来的相关研究提供参考。
【关键词】沙枣;多糖;提取;分离纯化
沙枣是胡颓子科胡颓子属落叶灌木,分布于我国“三北”地区和中西亚半干旱一带的区域,沙枣果实具有多种药物用途和营养价值,沙枣果实浸出物的浓缩液有抗炎作用,可用于肠炎,腹泻的治疗,是我国新疆、伊朗和土耳其民间治疗作呕和胃胀的传统药方[1-2]。药理实验也表明,对实验引起腹泻的动物,有抑制小肠运动功能[3] 。
近年来,有关植物多糖的研究备受关注。据临床研究表明[4],植物多糖能提高人体的免疫功能,具有抗肿瘤活性、抵抗细菌病毒的侵袭、抗炎症、抗感染、降血糖血脂、抗药性溃疡、抗衰老等作用。
一、多糖的生物活性
(一)增强机体免疫功能作用[5]
植物多糖最为突出而普遍的功能就是其对机体的免疫功能加强,而这种功能的发挥主要通过以下途径来实施的。(1)激活巨噬细胞[6];(2)激活T和B淋巴细胞;(4)激活补体。
(二)抗肿瘤作用[7]
自从1950年发现酵母多糖具有抗肿瘤效应以来,己分离出很多具有抗肿瘤活性的植物多糖。
(三)抗病毒作用
大量研究表明[8] ,许多多糖对细菌和病毒有抑制作用,如艾滋病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒、囊状胃炎病毒等。
(四)降血糖血脂作用
有许多文献研究和报道,植物多糖能够促进胰岛索,影响糖代谢酶的活性,促使外周组织对葡萄糖的作用,从而抑制糖异生。另外,甘蔗多糖也能降低体内血脂。
(五)抗衰老作用
有些植物多糖具有抗衰老的作用。一方面这类多糖作为免疫调节剂能增强机体的免疫功能;另一方面可以增强集团对自由基的清除能力和抗氧化能力。
二、植物多糖的提取方法
(一)传统提取方法
传统提取法主要指溶??提取法、酸提取法和碱提取法。
水是典型的极性溶剂且使用安全,各种植物多糖的提取中应用广泛。部分多糖可用稀酸进行提取,但在提取过程中,应注意时间、温度的控制,防止多糖中糖苷键的断裂[9]。糖醛酸的多糖及酸性多糖的提取,更适合用碱提取法[10]。溶剂提取多糖,简单易操作,但需要时间长,重复次数多,多糖的损失较大。
(二)微波辅助提取法
微波萃取是利用微波能来提高萃取率,对活性物质的破坏和损失大大降低,是一种最新发展起来的提取技术,已成为我国二十一世纪食品企业和制药企业生产的推广技术。
(三)超声波辅助提取法
超声波提取优于传统的三种提取方法,超声波提取条件无需高温,强化萃取20~40分钟即可获最佳提取率,所用时间短、成本低、能耗小、有效成分易于分离、净化的特点。因此,超声辅助提取法是一种高效实用的多糖提取方法
(四)超高压提取法
超高压提取法是最近几年研究最多也是最新的提取方法。超高压提取的条件是在室温20℃的密闭环境下进行,提取特点:一方面是避免热效应引起的物质结构变化和损失,防止有效物质的生理活性降低;二方面是不会造成溶剂的挥发,环境污染小,所以超高压技术具备“绿色”环保的要求。它在多糖的提取方面有很大的发展前景。
(五)酶提取法
传统的水提取多糖的得率低,常用含有果胶酶和纤维素酶的酶混合液处理植物组织,以破坏胞间层和去掉细胞的纤维素外壁,促使细胞的原生质体从细胞中渗透出来,能提高粗多糖的得率。去除蛋白质可以使用蛋白酶,可简化除蛋白质的操作。
三、多糖纯化分离研究现状
(一)除蛋白
Sevag法是除蛋白的经典方法,反应条件较为温和,但操作复杂、费时且样品损失较大。鞣酸或三氯乙酸沉淀法操作简便,但反应条件剧烈,可能导致多糖的降解。蛋白酶水解法专属性较强,但价格昂贵。三氟三氯乙烷法效率较高,但因其易挥发,不宜大量应用。多糖采用不同方法除蛋白,各有优劣,为达到更好的效果,也将几种方法或几种试剂联合使用。
(二)脱色
常用脱色方法有离子交换法、氧化法、金属络合物法、附法等。DEAE一纤维素是目前离子交换法中最常用的脱色剂,通过离子交换柱不仅达到脱色的目的,而且可以分离纯化单一多糖。H2O2是氧化法中常用的脱色剂,浓度不宜过高,否则引起多糖的降解。对于同时含有游离蛋白质和色素的多糖,可通过生成金属络合物的方法,同时除去蛋白质和色素。吸附法常通过活性炭、大孔树脂、硅藻土柱等达到纯化多糖的目的。
(三)除小分子杂质
除去多糖中所含的游离氨基酸、单糖等小分子水溶性成分最常用的是透析法。将多糖提
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