菲律宾蛤仔在苯并a芘胁迫下毒性效应与污染检测技术的研究.pdf.doc

 谨以此论文献给我的导师、家人和朋友 ------------------刘 栋    菲律宾蛤仔在苯并[a]芘胁迫下毒性效应与污染检测技术的研究 摘 要 本文根据我国近海多环芳烃污染现状，以菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）为 研究对象，研究了菲律宾蛤仔在苯并[a]芘胁迫下解毒代谢机制，苯并[a]芘在菲律宾蛤仔 体内生理毒代-毒效动力学模型，以及基于菲律宾蛤仔海洋多环芳烃污染监测技术，通 过本研究的开展，能够明确菲律宾蛤仔在苯并[a]芘胁迫下解毒代谢酶活力、损伤效应和 相关基因表达的变化，阐明菲律宾蛤仔在苯并[a]芘胁迫下解毒代谢机制，同时也全面地 筛选了有效的生物标志物，并用此构建了生理毒代毒效模型，并且也通过现场取样的相 关实验验证了生物标志物的有效性。 1菲律宾蛤仔在苯并[a]芘胁迫下解毒代谢机制的研究 本文研究了苯并[a]芘在菲律宾蛤仔体内的代谢途径，并阐明了苯并[a]芘及其代谢产 物在菲律宾蛤仔体内的累积分布规律，当 B[a]P进入贝类体内后，多种 I相代谢酶被激 活，导致大量 I相代谢产物的生成。同时，由于 GST活力的抑制以及 UGT和 SULT活 力的诱导水平相对较低，大量的 B[a]P I 相代谢产物富集在贝类组织中。随后，由于 II 相代谢酶底物（I相代谢产物）的增加，B[a]P I相代谢产物转化为 II相代谢产物的速度 逐渐提高，最终导致 B[a]P I相代谢产物的生成速度与代谢速度达到平衡。与 B[a]P I相 代谢产物相似，B[a]P II 相代谢产物的排出速度逐渐趋近于其形成速度，导致 B[a]P II 相代谢产物的含量趋于稳定，菲律宾蛤仔鳃和消化盲囊中的代谢酶活力和累积效应没有 显著的差异。 2 苯并[a]芘在菲律宾蛤仔体内生理毒代-毒效动力学模型的研究 通过相关性分析，筛选出了酶活力、损伤效应、基因表达等多个层面的生物标志物， 如 AHH、GST、SOD、DNA碱解旋以及 ahr、gst-pi、mn-sod的 mRNA基因表达，并构 建了生理毒代毒效模型，将菲律宾蛤仔体内的苯并[a]芘吸收、分布、代谢、排泄等体内 过程与生物效应偶联起来。 3 基于菲律宾蛤仔海洋多环芳烃生物监测技术的研究 青岛近海的现场取样研究表明，营海的 PAHs污染最严重，随后分别是红岛、丰城 和胶南。而莱州湾近海的广利港 PAHs污染最严重，随后分别是下营和南海铺。12月份 i  的 PAHs含量最高，但季节对菲律宾蛤仔累积和生物标志物的影响较小。通过相关性分 析可知，AHH 活力、ahr 的 mRNA 基因表达与菲律宾蛤仔组织中的累积含量相关性最 好，可作为 PAHs污染监测的有效生物标志物。 关键词：菲律宾蛤仔；苯并[a]芘；代谢途径；生物标志物；PBTK-TD模型 ii  Toxic Effects and detection technology of benzo[a]pyrene on clam Ruditapes philippinarum Abstract According to the situation of China’s offshore PAHs pollution, the auther studied the metabolic mechanism of Ruditapes philippinarum exposed to B[a]P, PBTK-TD model in clam exposed to B[a]P and marine PAHs pollution monitoring technology based on Ruditapes philippinarum. This study identified detoxification enzyme activity, damage effect, the related gene expression of Ruditapes philippinarum under the stress of B[a]P and the metabolic mechanism of Ruditapes philippinarum exposed to B[a]P. Moreover, this study comprehensively selected the effective biomarkers, developed the PBTK-TD and demonstrated the effect