血液病患者血小板抗体检测及其与血小板输注疗效相关性研究.docVIP

血液病患者血小板抗体检测及其与血小板输注疗效相关性研究 　　[摘要] 目的 检测血液病[白血病、再生障碍性贫血、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、骨髓增生异常综合征）]患者血清中的血小板抗体，探讨其与血小板输注疗效的关联，并分析血小板抗体产生的相关影响因素。 方法 用固相凝集法检测158例血液病患者输注前血小板抗体，同时用全自动血细胞分析仪检测每次血小板输注前及输注后24 h血小板计数，计算出实际血小板回收率（PPR），结合输注血小板后出血表现是否得到改善来判断输注疗效，分析血小板抗体与血小板输注疗效的相关性，并根据病因、患者性别、输注次数及血小板种类分别分组，对血小板抗体阳性检出率进行统计学分析。 结果 ①158例血液病患者血小板输注总有效率为53.16%，血小板抗体总阳性检测率为17.72%；②血小板输注有效组抗体阳性率（5.95%）远低于输注无效组（31.08%）（P0.05）；⑤不同血小板输注次数组间血小板抗体阳性率比较，差异有统计学意义（P 　　[关键词] 血液病；血小板抗体；血小板输注效果 　　[中图分类号] R331.1+43 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（a）-0082-04 　　血液病是原发于造血系统，或影响造血系统伴发血液异常改变，以血液、造血器官以及出、凝血机制的病理变化为其主要表现特征的各种疾病。此类患者多伴有原发或继发的血小板减少或功能缺陷，因血小板原因所致的出血也是血液病较为常见的并发症，其严重危害血液病患者的健康甚至生命。血小板输注是目前国内外防治血液病患者出血的不可替代的重要治疗手段，用于改善血液病患者的出血症状及降低出血病死率。但实际临床工作中，并非每例血小板输注都能取得满意的疗效，时有血小板无效输注发生[1]。血小板输注疗效的影响因素无外乎免疫因素和非免疫因素两大类，血小板抗体是目前引发血小板输注无效的最重要的免疫因素。本研究对158例血液病[白血病、再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）、特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocyopenic purpum，ITP）、骨髓异常增生综合征（mylodysplastic syndrome，MDS）]患者血小板输注前血小板抗体检测、血小板输注疗效评价，对两者之间的关联??以及血小板抗体的相关影响因素进行统计学分析，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　2011年8月～2012年12月贵州省人民医院收治的158例血液科输注血小板的白血病、AA、ITP、MDS四种血液病患者。其中男性82例，平均年龄40.5岁，女性76例，平均年龄43.2岁。 　　1.2 研究方法 　　1.2.1 标本采集及相关临床资料收集 　　1.2.1.1 血液标本的采集 用EDTA-K2作抗凝的采血管于血小板输注前和输注后24 h采集患者静脉血；计数血小板后将输注血小板前静脉血离心，取血浆保存于-20℃冰箱中待检（血小板抗体）。 　　1.2.1.2 病例相关资料的采集 收集患者的相关临床信息（姓名、性别、年龄、临床诊断、体重等）。 　　1.3 实验仪器及试剂 　　1.3.1 主要仪器：XT-1800全自动血细胞分析仪（性能评价符合要求）；TD-3B型血型血清学多用离心机。 　　1.3.2 实验试剂包括血小板抗体：血小板抗体检测试剂盒（固相凝集法）、指示红细胞（长春博讯生物技术有限责任公司；血小板计数试剂：为原装进口试剂。 　　1.4 血小板悬液的制备和品种 　　由贵州省血液中心提供。单采血小板即机采血小板，是用细胞分离机单采技术，从单个供血者循环液中采集到超过一个成人治疗量所需的的血小板数量，每袋含血小板约2.5×1011/L；浓缩血小板采用全血分离制备而成，400 ml全血可制备2 U浓缩血小板，2 U约含血小板 4×1010/L，1个治疗量（8～12 U）浓缩血小板需要由多个献血者血液制备。 　　1.5 血小板抗体检测（ 固相凝集法） 　　1.5.1 检测步骤 　　①制备血小板悬液：将商品化的冻干血小板稀释后直接使用。 　　②根据检测量取出反应条，标记患者、阴性及阳性对照孔。并向每孔加入上述血小板悬液一滴（50 μl），轻摇反应板约10 min。 　　③用平板离心机将反应板以50×g离心5 min，使血小板固定在反应板底部。 　　④倒出反应板内的液体，用滴管滴加洗涤工作液清洗3次，洗涤过程中轻摇微孔板，最后1次洗涤后将反应板倒置于吸水纸上吸干残余液体。 　　⑤立即向每个反应孔中加入2滴（100 μl）低离子强度溶液，并分别向相应孔中加入1滴（50 μl）患者样本、阳性对照及阴性对照。低离子强度溶液将由紫色变为天