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输血前不规则抗体筛查与直接抗人球蛋白试验意义
输血前不规则抗体筛查与直接抗人球蛋白试验意义
[摘要] 目的 探讨对输血患者在输血前实施直接抗人球蛋白试验以及不规则抗体筛选的检查结果,并总结检查临床意义。 方法 输血前患者2000例,实施不规则抗体筛选以及直接抗人球蛋白试验(DAT)两种辅助检查,分析结果以及研究性别、既往妊娠史和输血史对结果的影响。 结果 不规则抗体筛查检查阳性率为0.20%,直接抗人球蛋白试验结果阳性率为1.05%;既往输血史或者妊娠史是影响不规则抗体筛查以及直接抗人球蛋白试验结果的相关因素。 结论 不规则抗体筛查以及直接抗人球蛋白试验可以针对检查结果实施输血,避免溶血反应,临床上对患者安全以及治疗有很大帮助。
[关键词] 输血;直接抗人球蛋白试验;不规则抗体筛查;微柱凝胶法
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2013)30-0137-03
现阶段的文献资料显示引起溶血反应的最主要原因是红细胞不规则抗体(irregular antibodies)[1,2],而不规则抗体产生原因不一,可能是妊娠免疫产生,也可能是多次以及大量的输血产生[3],红细胞不规则抗体因缩短了红细胞存活时间,严重的导致威胁生命的免疫溶血性输血反应,因此目前对输血患者要事先进行不规则抗体的检查以及筛选,以此保证患者临床输血安全性[4]。
实施直接抗人球蛋白试验(DAT)的目的是验证不完全抗体是否导致了红细胞过敏[5],而DAT的工作原理是体内由于不完全抗体(或补体)引起红细胞致敏因此发生凝集。检查结果阳性的患者的配血将会难度增加,国外的实施方法微柱凝胶技术已经广泛使用[6]。
本研究选择2010年12月~2012年12月间浙江省嵊州市人民医院住院部输血前患者共2000例,检查方法具体为微柱凝胶法,具体实施不规则抗体筛选以及DAT两种辅助检查,检查结束后对结果显示阳性的标本进一步实施抗体特异性鉴定检查。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2010年12月~2012年12月间浙江省嵊州市人民医院住院部输血前患者共2000例,其中男1102例,女898例,年龄1~87岁,中位年龄(56.45±6.29)岁;包括643例孕产妇、手术需血712例、住院部治疗645例。
1.2 检查仪器
西班??戴安娜公司提供卡式专用离心机、孵育箱(37℃)以及微柱凝胶抗人球蛋白检测卡;上海血液生物医药有限公司提供不规则抗体检测试剂,包括人工细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,16种抗原,分别为D、C、E、c、e、M、N、s、P1、Lea、Leb、k、Jka、Jkb、Fya、Fyb;上海血液生物医药有限公司提供鉴定谱细胞1~10号。
1.3 辅助检查方法
①不规则抗体筛查方法:检查操作严格按照《全国临床检验操作规程》,患者于检查当日清晨取静脉血5 mL(促凝管抽取),在常温下静置30 min直至标本完全凝固,置于离心机实施离心操作120 s,对分离出的血清剔除纤维蛋白。根据抗人球蛋白微柱凝胶筛检卡的使用说明将不同对象做好标记,取3个不同的微柱凝胶管,分别加入50 μL 0.8% Ⅰ型、50 μL 0.8% Ⅱ型、50 μL 0.8% Ⅲ型不规则抗体筛查细胞试剂,同时分别加入50 μL检验血清与三个凝胶管;完毕后将检测卡置于孵育箱,在37℃环境下孵育15 min;此后置于卡式离心机进行离心操作,离心操作分为两阶段,第一阶段离心转速900 r/min,离心120 s,第二阶段离心转速1500 r/min,离心180 s;结果分为阴性与阳性,阴性结果判别标准为检测细胞不出现凝集现象,游离筛检红细胞沉降至凝胶柱底部,阳性结果判别标准为与检测细胞发生凝集现象,处于凝胶柱上端或中部悬浮状态;对于结果显示阳性标本进一步检测,实施谱细胞鉴定不完全抗体特异性。②直接抗人球蛋白试验方法:检查前取试验患者红细胞悬液(0.5%~0.8%)50 μL;取微柱凝胶抗人球蛋白检测卡,卡抗IG+C3d,加入所采集悬液,立即置入卡式离心机进行离心操作,离心时间维持5 min;记录试验结果,对显示阳性的标本进一步实施分型操作,具体实施抗IgG、抗C3d、抗IgG+C3d分型操作。
1.4 统计学方法
对结果使用统计学软件SPSS 13.0进行分析,计数资料采用χ2检验,P 对输血前患者实施不规则抗体筛查的主要目的在于:①对于输血用于治疗目的的患者,实施不规则抗体筛查利于选择血液,根据筛查结果选择无针对特别抗体的响应抗原血液,这样就可以避免因为选择血液不当造成溶血性输血反应,既提升了用血安全性又避免了血液使用浪费;②对孕产妇实施不规则抗体筛查,根据检查结果对新生儿溶血病进行有效的防治,早期诊断早期干预,提升新生儿出生时
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