阑尾消炎丸含量测定.docVIP

阑尾消炎丸含量测定 　　【摘要】建立反相高效液相色谱法测定阑尾消炎丸中黄芩苷的含量测定方法。方法：采用安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），乙腈-水-磷酸（25：75：0.2），检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。黄芩苷在26～234μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99996）。黄芩苷平均回收率分别为99.8%。结论：本法简便、准确，可用于阑尾消炎丸中黄芩苷的含量测定。 　　【关键词】阑尾消炎丸；含量；测定 　　阑尾消炎丸由金银花、大青叶、败酱草、蒲公英、鸡血藤、川楝子、大黄、木香、冬瓜子（麸炒）、桃仁（去皮）、赤芍、黄芩组成。黄芩别名山茶根、土金茶根。黄芩具有清热燥湿，凉血安胎，解毒等功效。黄芩常用于肺热咳嗽、湿热黄胆、痢疾、咳血、目赤、痈肿疖疮等症。《本草图经》记载：“张仲景治伤寒心下痞满，泻心汤四方皆用黄芩，以其主诸热，利小肠故也。又太阳病下之利不止，有葛根黄芩黄连汤；及主妊娠安胎散，亦多用黄芩。”阑尾消炎丸具有清热解毒，散瘀消肿的功效。阑尾消炎丸用于急慢性阑尾炎。阑尾消炎丸原有质量标准只有鉴别无含量测定。本实验采用高效液相色谱法对阑尾消炎丸中的黄芩苷的进行了含量测定。 　　1、仪器与试药 　　1.1仪器：WP-UP-Ⅱ-30分析型实验室专用超纯水机（四川沃特尔水处理设备有限公司）；320XT电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）；FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；B8510E超声波清洗机（北京星越天成科技有限公司）；TU-1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。 　　1.2色谱柱：安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。 　　1.3对照品：黄芩苷购自中国药品生物制品检定所。 　　1.4试剂：甲醇（北京仪化通标科技有限公司）、乙腈（上海安谱科学仪器有限公司）、冰醋酸（北京谱朋科技有限公司）、磷酸（北京化标源科技有限公司）、三乙胺（国药集团化学试剂有限公司）。 　　1.5试药：阑尾消炎丸 　　2、测定方法确定 　　2.1色谱条件 　　依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-9]。流动相：乙腈-水-磷酸（25：75：0.2），检测波长：280nm，流速：1.0ml·min-1。柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于2000。 　　2.2对照品溶液的制备 　　精密称取黄芩苷对照品适量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。 　　2.3供试品溶液的制备 　　2.3.1制备方法的选择 　　精密称取阑尾消炎丸0.3g，精密称定，加60%甲醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml容量瓶中，用少量60%甲醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一容量瓶中，加60%甲醇至刻度，摇匀。精密称取阑尾消炎丸0.3g，精密称定，加60%甲醇40ml，超声3小时，放冷，滤过，滤液置100ml容量瓶中，用少量60%甲醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一容量瓶中，加60%甲醇至刻度，摇匀。实验结果，表明加热回流含量高于超声，所以选择加热回流提取。 　　2.3.2供试品溶液的制备 　　精密称取阑尾消炎丸0.3g，精密称定，加60%甲醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml容量瓶中，用少量60%甲醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一容量瓶中，加60%甲醇至刻度，摇匀。 　　2.4专属性试验 　　金银花、大青叶、败酱草、蒲公英、鸡血藤、川楝子、大黄、木香、冬瓜子（麸炒）、桃仁（去皮）、赤芍粉碎成细粉，其余败酱草、蒲公英、鸡血藤、冬瓜子（麸炒）、桃仁（去皮）、赤芍及剩余大青叶加水煎煮二次，第一次3小时，第二次1小时，滤过，合并滤液，浓缩至清膏，与上述药粉泛丸，干燥。照2.3.2项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在黄芩苷出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。 　　2.5精密度试验 　　精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇使溶解，制成浓度为30μgmL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。 　　2.6对照品的线性考察 　　精密称取黄芩苷对照品6.5mg，置25ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标