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食品微生物之水产品中微生物检验方法研究进展 　　[摘要] 本文以DNA和免疫学为基础，从免疫磁珠分离法、基因芯片检测法、传统的PCR技术和定量的PCR技术等角度对水产品中微生物的检测方式进行了简单阐述。 　　[关键词] 水产品；微生物；检测技术 　　[中图分类号] R254.7 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）07-0116-02 　　Research progress of microbial test method of aquatic product of microorganisms in food 　　WANG Guoqin 　　Pingdingshan Center for Disease Control and Prevention in Henan Province， Pingdingshan 467000， China 　　[Abstract] This article in DNA and immunology as the foundation， from immune magnetic bead separation， using gene chip method， the traditional PCR technology and quantitative PCR technology aspects of microorganisms in aquatic products detecting way briefly elaborated. 　　[Key words] Aquatic products； Microbial； Detection technology 　　在水产品当中存在着大量的微生物，对人类的身体???康带来了很大的威胁，会引起腹泻、呕吐、败血症等一系列病症。微生物对水产品的影响是造成食品安全隐患的首要因素。现在对水产品微生物检测方向主要是对大肠杆菌、菌落总数和致病菌等研究[1]。传统的微生物检测方式以分离培养、血清试验和生化技术等为主，但是，面临的主要问题是资金使用大、人工劳动多、效率有待提高、特异性较弱等问题，没能从根本上解决水产品的质量安全，检测力度没有达到标准要求[2]。随着我国分子生物学技术的不断发展，整体的检测效率有了质的飞跃，主要有检测效率高、针对性强、准确性有保证等特点，在对水产品微生物检测方面有着很大的使用前景，并且具有很大的挖掘空间。本文对水产品中微生物的检测方法做一探讨。 　　1 水产品中微生物的检验方法 　　1.1 采用免疫磁珠的分离方式 　　之所以使用免疫磁珠的分离方式，是因为可以将特异性的抗体与磁性颗粒的表面进行关联，可以让样品中的微生物进行特异性的结合，通过外部磁场的影响，装有病毒的微生物磁性球会在其作用之下向两端靠拢，这样就可以使微生物从样品当中脱离出来[3]。 　　这种方法较普通检测方式而言，有着很明显的优势，可在含有大量细菌的溶液当中具有选择性的将微生物分离出来，并且具有较高的效率。与使用镜检技术和PCR等快速检测方式相互取长补短，免疫磁性分离技术可以将水产品微生物检测效率大大提高。例如：在创建免疫捕获-RT-PCR技术的过程中，即首先使用IgG抗体将甲型肝炎病毒吸收到标本之上，之后把该病毒的RNA通过逆转录形成cDNA[4]。使用PCR技术进行增长扩充，将传统核酸提取方式的步骤进行精简。这种方法体现出的优势在于更加灵敏，可以达到逆转录-PCR技术与打点杂交相结合的效果。把水产品当中的李斯特菌通过免疫磁性分离进行作用，以PCR技术为基础，可以产生具有独特效果的李斯特菌IMS-PCR技术，对水产品进行检测。通过使用该种技术进行检测，我们可以得到如下结论：该方法可以保证食品基质、杂菌和培养及成分不再对PCR检测带来严重性干扰，并且具有高敏感度、高效率和高准确性的特点。 　　1.2 采用基因芯片检测方式 　　所谓的基因芯片技术就是把每个基因寡核苷酸放在芯片的表面上，取得微生物样本的DNA，经过PCR扩增之后可以使用荧光标记探针，与芯片表面的寡核苷酸进行点杂交，最后使用精确的扫描仪进行定量并对荧光分布进行分析，最终确定被检测样品当中是否存在某种微生物[5]。基因芯片检测方式可以对微生物进行全面、高效和并行的检测。从数据角度分析，它可以对隐藏的病原体进行检测，使用一张芯片对某一种病原菌的各项指标进行检测，因此具有很好的效果。例如：经过混合之后的基因组可以准确地分辨出各种李斯特菌相关联的分离物，美国科学家经过分析，将单管复合体扩增与基因芯片技术对李斯特菌进行检测和分辨。使用固定、高效的措施对水产品中各种微生物进行获取、处理和分析是我们所期望的。现在，我国虽然在对样品的处理和相关基因芯片技术有了