实验二 实验动物分组、标记与染毒方法.pptVIP

2 实验动物分组、标记与染毒方法 下一张 上一张 开 始 结 束 实验目的 实验内容 实验材料 实验步骤 实验结果 结果分析 南京晓庄学院 院 系：生化环院 任课老师：吴雨龙 任课班级：09食品、行09食品 食品专业 实验动物科学的分组、标记和合理的染毒，是取得良好试验结果和结论的前提，也是每一项毒理学试验首先要做的工作。 通过本试验学习实验动物的科学分组、标记和常用基本染毒技术。 实验二 实验动物分组、标记与染毒方法 实验二 实验动物分组、标记与染毒方法 实验目的： 1 实验内容： 2 健康实验动物的选择和性 别鉴定 实验动物分组和称重 血清与血细胞分离 尿液收集 组织匀浆的制备 实验材料： 3 实验动物：成年健康小鼠。 染料：结晶紫、苦味酸、品红。 毛笔或棉球 动物称或天平 。 （一）健康动物的选择和性别鉴定 实验方法和步骤： 4 1.外观体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。选择时重点检查以下几项： 眼睛 明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物。 耳 耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮。 鼻 无喷嚏，无浆性粘液分泌物。 皮肤 无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。 颈部 要求颈项端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。 实验方法和步骤： 4 消化道 无呕吐、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。 神经系统 无震颤、麻痹。若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动，应放弃该动物。 四肢及尾 四肢、趾及尾无红肿及溃疡。 2.实验动物的性别鉴定 大鼠与小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄鼠，小者为雌性。成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性在腹部可见乳头。 实验方法和步骤： 4 （二）称重与分组 1.随机数字分组法 称重鼠称的感应量在0.1g以下。 随机分组 为了得到客观的剂量－反应关系，应将一群动物按统计学原则随机分配到各个试验组中，可按随机数字表方法随机分组。举例说明如下。 设将30只雄性动物平均分成A、B、C、D、E、F六组，每组5只动物。将已编好号的动物依号码用随机数目表分配。 实验方法和步骤： 4 如选随机数目表第二行，从第一个数目开始，依次抄下30个数目（依横行、纵行、甚至斜行抄录均可）。将各数目一律以组数除6，以余数1,2,3,4,5,0代表分配于A、B、C、D、E、F 各组动物。结果如附表1-2。 F C B D D A E A C F C A F A C 归组 0 3 2 4 4 1 5 1 3 0 3 1 0 1 3 除6余数 66 27 62 76 16 73 89 79 51 24 51 7 36 7 27 随机数目 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 动物号 B A B E F B C B C F B A F B A 归组 2 1 2 5 0 2 3 2 3 0 2 1 0 2 1 除6余数 32 37 32 53 42 20 57 14 81 42 62 67 24 74 97 随机数目 15 14 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 动物号 2.随机区组分组法 实验方法和步骤： 4 将雌雄各30只18-22g的小鼠（两个实习小班，一班用雌鼠，一班用雄鼠）分别用随机区组法分为6个组。 准备9个饲养笼，依次标明18,18.5,19…22g将30只小鼠按体重放入相应笼内。 准备6个饲养笼，依次标明1组，2组…6组。再将6个小球珠标上1,2,3,4,5,6。 组内小鼠编号。用饱和苦味酸（黄色）酒精溶液。如果再同时使用复红（红色）的饱和酒精液，即可标记1-100号。 将球珠在盒内摇动后，任意拾起一个。如果该球珠是5，则从18g罐中任意抓一只小鼠，作为5组1号，用苦味酸标上1号，放入5号饲养笼，并做好记录。再拾起第二颗球珠，如上法抓鼠编号。如此拾完5颗小球珠，每组均分得小鼠1只（全为1号）。 重新混匀5个小球珠，按上述方法将每组的2,3,4,5号鼠分别编组。 在各组罐上挂上剂量牌，注明性别、组号、剂量及每只小鼠实际灌胃量。 实验方法和步骤： 4 实验方法和步骤： 4 （三）血清与血细胞分离 1.制备血清 将全血置于4℃冰箱保存3-4h，以1500-2000r/min离心15min。上清液呈淡黄色即为血清，吸出备用；如上清液呈淡红色，表明有溶血，一般应废弃。 2.血细胞分离 分离血细胞时，采血所用器具均应先行抗凝处理。实验动物安全采血量。 实验方法和步骤： 4 （四）尿液收集 大动物与小动物尿液收集使用各自的代谢笼。代谢笼主要由备有动物饮水和装