第10篇 酶促反应动力学.ppt

[S] 1/[S] v 1/v 0.20 5.0 0.150 6.66 0.40 2.5 0.200 5.00 0.85 1.17 0.275 3.64 1.25 0.80 0.315 3.17 1.70 0.58 0.340 2.94 2.00 0.50 0.350 2.86 8.00 0.125 0.360 2.78 解2、1/v 对1/[S]作图法： 7 6 5 4 3 2 1 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 1/v 1/[S] -1/Km=-2.85?10 5 Km=3.51 ?10-6 1/Vm=2.55 ; Vm=0.39 （一）酶浓度的影响 在一定温度和pH下，当底物浓度大大超过酶浓度时，酶促反应速度与酶的浓度呈正比。 酶浓度对速度的影响机理：酶浓度增加，[ES]也增加，而V=k3[ES]，故反应速度增加。 三、其他影响因素 （二）温度 双重影响：温度升高,酶促反应速度加快(温度系数Q10：反应温度提高10? C，其反应速度与原来的反应速度之比)。温度升高到一定程度, 引起酶变性，酶活性降低甚至丧失，从而使反应速度降低。 因此大多数酶都有一个最适温度。在最适温度(optimum temperature )条件下,反应速度最大。 酶对温度的耐受力与其存在状态有关。 温度对酶促反应速度的影响机理： 1. 温度影响反应体系中的活化分子数：温度增加，活化分子数增加，加快中间复合物ES的形成与分解，反应速度增加。 2. 温度影响酶的活性：过高的温度使酶分子稳定性下降，活性中心被破坏，酶变性失活，反应速度下降。 最适温度Tm是酶的特征之一，但不是常数。因为一种酶的最适温度不是一成不变的，受酶的纯度、底物、激活剂、抑制剂、反应时间等因素的影响。因此，酶的最适温度与其它反应条件有关。 （三）pH pH影响酶促反应速度的原因： (1) pH影响酶的空间结构：过酸或过碱使酶的空间结构遭到破坏，引起酶变性失活。 (2) pH影响底物的解离状态：使底物不能与酶结合形成ES中间复合物，或者生成后不能释放产物； (3) pH影响酶分子有关基团的解离：影响酶活性部位上有关基团的解离，不能结合或催化底物；影响ES中间复合物的解离状态，不能生成产物；影响维持酶分子空间结构的有关基团的解离，改变酶活性部位的构象，进而降低了酶的活性。 一些酶的最适pH （四）激活剂 能使酶活性提高的物质，都称为激活剂(activator)，其中大部分是离子或简单的有机化合物。如Mg++是多种激酶和合成酶的激活剂，动物唾液中的α-淀粉酶则受Cl-的激活。 通常，酶对激活剂有一定的选择性，且有一定的浓度要求:一种酶的激活剂对另一种酶来说可能是抑制剂；当激活剂的浓度超过一定的范围时，就成为抑制剂。 原理：a.酶活性中心的必需基团 b.酶-底络合物形成的桥梁 c.作为某些酶的辅助因子 d.保护-SH酶不被氧化 激活剂 四、酶的抑制作用-抑制剂的影响 区别于酶的变性 （一）抑制程度的表示方法 （1）相对活力分数（残余活力分数） （2）相对活力百分数（残余活力百分数） （3）抑制分数（被抑制而失去活力的分数） （4）抑制百分数 （二）抑制作用的类型 1．不可逆抑制作用（irreversible inhibition）