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第十章 遗传信息的表达与传递 DNA复制 DNA分子合成一个与自己相同的DNA分子的过程叫DNA复制。 一、DNA复制的基本形式和过程 (一).DNA复制的基本规律: 1.DNA复制方式 1)半保留复制: 通过DNA复制形成的新DNA分子, 与原来的DNA分子完全相同。 子代DNA分子的两条链中,一条来自亲代DNA分子,另一条是新合成的,所以又称为半保留复制。 2)复制的方向:5‘-3’ 3)半不连续复制 一股子链的复制是连续的、另一股是不连续的现象称为半不连续复制。 二、复制所需的引物和酶 引物:RNA引物 酶:异构酶、解旋酶、聚合酶、连接酶、 单链DNA结合蛋白(SSB)、拓扑异构酶 引发酶(RNA引物合成酶)和引发体 DNA A、B、C 原料: 4种脱氧核苷酸 1.RNA引物 在引发酶(引物合成酶)催化下,合成RNA引物。 RNA引物的长度一般为4~12个核苷酸。 2.DNA聚合酶 DNA聚合酶 –催化合成DNA。 (1)DNA聚合酶:原核细胞有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。主要由Ⅲ型负责DNA链的延伸,Ⅰ型有5′-3 ′和3 ′-5 ′外切酶活性,负责RNA引物的切除。 (2)核苷酸选择:根据摸板的碱基序列,从细胞中选择相应的游离核苷三磷酸进行DNA链的合成,此过程叫“核苷酸选择”。 三、DNA的复制过程 在酶的作用下,DNA开始复制的部位氢键断裂(DNA双螺旋松开),此处膨大,叫复制泡。 复制叉:松开的两股链和未松开的两股链外形如“Y”字形 复制子:起始点和复制叉共同构成的一个单位,叫复制子 DNA复制的起始 前导链和后导链 DNA复制时, 5′→3′方向母链和3′→5′方向母链合成子链的形式是不同的。 前导链: 从5 ′→ 3 ′方向是连续合成的,合成的子链叫前导链。 后导链:与5′→3′母链互补,不连续性合成许多片段,称岗崎片段。岗崎片段最后由DNA连接酶连接成一条完整的链,称做后导链。 2)以DNA单链为模板,按照碱基互补配对的原则, 在DNA聚合酶催化下,合成与模板DNA完全互补的新链,并形成一个新的DNA分子。 (3)免错机制与改错机制 免错机制:DNA聚合酶本身有DNA外切酶活性,当DNA复制时,外切校对酶将那些错误核苷酸清除掉。 改错机制:错配修复酶也参与碱基的错配修复。识别新合成的DNA链中错配的核苷酸,并将其去掉。 四、 基因转录的基本特征 基因(gene):遗传物质的表达单位,具有指导RNA或(和)蛋白质合成的生物学功能。 1909年丹麦遗传学家W. Johannsen提出 基因组(genome):单倍染色体所有基因的总称。 1.只有部分基因会发生转录 2.转录是不对称的 3.转录产物的原料是核糖核苷酸(碱基为A、U、C、G) 4.参与转录的RNA聚合酶无需引物 五、与转录有关的基因结构 1. 启动子 原核:Pribnow box -10bp TATAATG CAT box -35bp TTGACAT 真核: TATA box -25 - 50bp CAAT box -70 - 80bp 2. 编码区: 起始密码子 至 终止密码子 3. 终止子: 提示转录终止的序列 依赖终止因子 终止因子非依赖 4.转录调节序列: 增强子 转录因子结合序列 编码区: 起始密码子 至 终止密码子 开放阅读框(open reading frame) 断续(裂)基因 (split gene) 外显子(exon) 内含子(intron) 原核细胞基因结构特点 1. 只有一个DNA分子,裸DNA形式存在 2. 结构简单,编码区比例高 3. 基因多为单一序列 4. 基因以操纵子结构存在 操纵子(operon):多个性质相同的基因串联在一起形成基因簇,在一套调控系列控制下转录表达 5. 存在重叠基因 真核基因结构特点 1. 基因组DNA比较庞大,结构复杂 2. 基因组DNA中非编码序列占绝大部分 3. 基因多为断续基因(split gene),编码 区中含有内含子(intron) 4. 不存在重叠基因 5. 含有大量的重复序列 高度重复序列 中度重复序列 低度重复序列 原核细胞和真核细胞核糖体 化学组成比较 核糖体的聚合和解离 Mg2+ <1mM 1-10mM >10mM 大小亚基 解离 聚合 二聚体 注:蛋白质合成时,往往以多聚核糖体形式进行,即一条mRNA上同时结合多个核糖体,同时在多个部位合成肽链 存在方式:游离核糖体、附着核糖体 多肽生物合成的抑制剂 嘌呤霉素:氨基酰tRNA竞争抑制
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