二叔丁基对甲酚(BHT)对SD雄性大鼠生殖功能的影响C.ppt

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二叔丁基对甲酚(BHT)对SD雄性大鼠生殖功能的影响C

睾丸特征性酶活力测定 ACP ——支持细胞溶酶体特异酶 AKP ——生精细胞分裂活动、葡萄糖向各级生精细胞的转运 LDH ——生精细胞糖代谢生能的主要酶 LDH-x —— LDH同工酶,为精子的生存和活动提供能量 睾丸特征性酶(1) 可见高剂量染毒组大鼠睾丸组织中ACP、AKP活性明显降低 ,这可能与BHT导致了生精上皮的变性有关。 各染毒组大鼠睾丸组织LDH及LDH-x的活性明显低于对照组 ,提示BHT可通过影响生精细胞的无氧代谢 , 阻碍细胞能量的供给 ,从而造成生精细胞能量代谢发生障碍 , 逐渐导致细胞变性 ,使得生精能力降低。 检测方法及结果 5、脏器及腺体组织学观察: 大鼠左侧睾丸,HE染色,行组织学观察。 SD雄性大鼠睾丸切片(HE染色,×4) SD雄性大鼠睾丸切片(HE染色,×40) 大鼠睾丸组织学观察 对照:睾丸组织内生精小管轮廓及细胞层次清晰,大部分管腔内可见精子生成。 随着剂量的增加,观察到睾丸组织结构出现坏死并逐渐加重,生精小管轮廓不规则,生精细胞排列渐紊乱。管腔内具有精子生成的生精小管比例逐渐减少。 实验结论 本次研究发现,与对照组相比,BHT染毒大鼠高剂量组脏器系数明显下降,精子活力及睾丸特征性酶活力明显降低,组织切片观察也提示睾丸异常。由此可见,BHT对大鼠存在较明显的生殖毒性。 BHT对睾丸中酶活性的影晌可能是其雄性生殖毒性发生的重要机理。 本次研究中所检测的睾丸酶活性在高剂量组全部降低,提示BHT可能通过影响各种酶的活性,干扰睾丸能量代谢和分裂过程.对睾丸造成一定程度的损伤。具体表现为睾九重量显著降低,精子活性明显降低。精子活性与酶活力的变化一致,提示大剂量的BHT可能通过影响酶的活性,损伤各级生精细胞导致生精上皮不可逆的损害。 参考文献 Umenura T, Kodama Y, Hioki K, et al. Butylhydroxytoluene(BHT) increases susceptibility of transgenic rasH2 mice to lung carcinogenesis[J]. J Cancer Res Clin Oncol, 2001, 127(10): 583-590 杨科峰,同济大学学报:医学版,2001年 22卷 5期,86-88,92 庄勋,黄晓冬,姜声扬,仇梁林,2,6-叔丁基对甲酚致大鼠肺巨噬细胞凋亡的作用,毒理学杂志,2006年12月第20卷第6期 李建武,余瑞元,袁明秀,等,生物化学实验原理和方法〔M〕.北京:北京大学出版社,1999.351-353. 李建武,余瑞元,袁明秀,等,生物化学实验原理和方法〔M〕.北京:北京大学出版社,1999.351-353. 徐莉春,王心如.福对大鼠辜丸毒作用的酶学研究〔J〕.中国公共卫生,2000, 16(2):119-120. 李震 ,王浩 ,王振林.外源性雌雄激素对大鼠睾丸组织中LDH - X的影响 [J].生殖与避孕 ,1988,8 1 :53. 梁鹰 ,王敏玲 ,陈淑华.正常男性与不育男性精浆酶活性比较 [J].生殖与避孕 ,1993,13 4 :264. 赵春艳. 国外医学卫生学分册, 1995, 22 2 : 77~79. 特别鸣谢 生理学教研室 王庭槐 教授 生理学教研室 谈智 老师 生理学实验室 罗汉川 主任 生理学实验室 邱灿华 老师 生理学实验室 杜高安 老师 生理学实验室 李晓君 老师 分子生物学实验室 黄小荣 老师 生命科学学院 王宏斌 副教授 广东省人类精子库 唐立新 主任 广东省人类精子库 汤乐 医生 组胚教研室 陈大堤 老师 组胚教研室 袁广明 老师 免疫实验室 李丽 师姐 以及: 中山医学院生理学教研室 中山医学院生理学实验室 中山医学院实验动物中心 中山医学院免疫实验室 中山医学院分子生物学实验室 中山大学生命科学学院细胞生物学及遗传学实验室 广东省人类精子库 Question Time 05级1班 第五组 * Company LOGO 睾丸特征性酶 酸性磷酸酶 (ACP) 碱性磷酸酶 (AKP) 乳酸脱氢酶 (LDH) 乳酸脱氢酶X酶 (LDH-x) AKP (碱性) ACP (酸性) 支持细胞 溶酶体 精细胞溶酶体前体 生精细胞分裂 活力较强 葡萄糖 各级转运 磷酸酶 精原细胞 早期发育时期的初级精母细胞 特异性酶 糖酵解酶系 LDH LDH-x 位置 作用 位置 作用 精子细胞胞质 精子尾中段线粒

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