《生理科学实验作业范本》蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究课件.ppt

- 基础医学实验 蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究 Experimental Research of Compound Action Potentials on Toad Sciatic Nerve Trunk 厉老师 一、蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究 1.讲解和讨论：实验方法、观察项目、问题及假设 2.示范： 神经干制备、动作电位引导、数据测量 3.自主实验 4.数据汇总统计 5.讨论：对实验数据统计结果的分析与机制探讨 二、失血代偿（高仿）实验 1.讲解 2.自主实验 3.讨论 本堂课安排 1.独立完成实验，不串岗，认真如实记录数据 2.遵守实验室规制制度，离开实验室须经教师许可 3. 数据资料用邮件发回，请不要使用移动存储器 4.器具须用水擦洗、擦干，按原样整齐放置 5.实验台须用湿的干净抹布擦拭干净。用品摆放整齐、关机 6.高真实验完成后，关机、将椅子放回原位 7.第3、第4组值日：督查各组善后工作；扫地、拖地，凳子放整齐；清洁洗涤台、将动物尸体送动物中心 8.实验报告在2周内提交 注意事项 本实验相关理论讨论 1、神经纤维的基本结构？ 2、从神经纤维膜外结构不同可将神经纤维分为哪两类？ 3、静息电位如何形成？ 4、形成胞内高K+、胞外高Na+的主因是什么？ 5、动作电位是如何产生的？ 6、动作电位在神经纤维上是如何传导的？ 7、细胞内记录的AP与细胞外记录的AP有何不同？ 8、谁最早记载生物电现象 9、谁最早证明有生物电的存在 1786年Galvani发明Galvani电镊子 Galvani（1737～1798）意大利解剖学家及物理学家 Introduction 生物电发现 锌铜弓刺激神经的肌肉收缩实验 最早的生物电记载 检流计，1848年德国人发明 1850年，用检流计测得蟾蜍坐骨神经干动作电位的传导速度为20～30m/s electrode 细胞外记录（ Extracellular Recording）实验阶段 1933年美国科学家 Gasser和 Erlanger用示波器对外周神经活动进行研究性总结，并发表了著名的论文《Electric signals of Nervous Activity》（1939年） 1897年德国人发明了阴极射线示波器 细胞外记录（ Extracellular Recording）实验阶段 剑桥大学Hodgkin和Huxley应用金属微电极 对乌贼巨神经纤维电活动进行系统研究， Hodgkin和 Katz提出离子假说 细胞内记录（ intracellular Recording）实验阶段 玻璃微电极 细胞电生理实验 1949年，凌宁和Gerard 发明玻璃微电极。电压钳和膜片钳将电生理研究推向分子水平 测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（compound action potential ，CAP），探讨蟾蜍坐骨神经干双相动作电位（ biphasic action potential, BAP ）的特征、BAP形成机制及神经损伤、药物对神经兴奋的影响 目的（objective） 蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究 1 材料和方法 (Materials and methods ) 1.1 实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad），10只，雌雄不拘、体重 g。 婚垫 雄蟾 雄蟾 雌蟾 蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究 1.2 药品(drug) 任氏液、4% 普鲁卡因、3 mol/L 氯化钾 任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每升溶液含 NaCl 6.5 g、KCl 0.14 g、CaCl2 0.12 g,、NaHCO3 0.20 g、NaH2PO4 0.01 g。任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。可用于蛙的组织、器官润湿和营养。 普鲁卡因：局部麻醉药，用于浸润麻醉、传导麻醉等。普鲁卡因与Na+通道内侧受体结合，使通道蛋白质构象变化，促使Na +通道失活状态闸门关闭。 蟾蜍坐骨神经干动作电位的实验研究 1. 3 器材( Experimental apparatus) RM6240 多道生理信号采集处理系统(RM6240 multichannel physiological recording and processing system )（成都仪器厂）、神经标本盒（ nerve chamber )。 RM6240C多道生理信号采集处理系统 神经干标本盒 S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+ S+、S-刺激电极，E接地电极，r1- 、r1+和r2- 、r2+引导电极， 刺激