基因工程菌-简单的案列.ppt

基因工程-专题 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改造生物的遗传性状。 基因工程(gene engineering)的“四步曲” 偶氮还原酶基因工程菌的构建 gic4590853-4590257 Shewanella oneidensis MR-1, complete genome ATGTCTAAAGTCCTTGTATTAAAATCCAGTATTCTTGGCGGTTATTCACAATCTGCCTTGTTAGTTGACT ACTTAATCGGTAAATGGGAAAAGCAGGGCGCAACCATCACGGTACGCGACTTAGCGGGTAAAGATGTGTT ACCTATGGTTGACGGTGAAATCGCCTCTGGCTTACGTGGCGGCGCTGAGCTAACTGCACGTCAGCAAGAG ATGCTCGATCTGTCTAACGCCTTAGTGGAAGAGTTAAAAGCGAACGACACTATCGTGATCACTGCGCCAA TGTACAACTTCAATATTCCAACCCAGCTGAAAAACTGGATTGATTTTGTGGCCCGTGCGGGTGTGACCTT CACTTACACCGAGAATGGCCCTAAAGGCTTAGTGGAAGGTAAACGCGCCGTGTTGATCACCACCCGTGGT GGCGCCCATAAAGATGGTCCAACCGATCACATGGTGCCTTTCTTAAAAACCTTCCTCGGTTTTATTGGTA TCACCGATGTGGACGTGGTTTATGCTGAGGCGCTGAACATGGGCCCAGAAGCTAACCAAAAAGGGATCAG CGAAGCTAAAGCCAGTATCGATAAGTTAGCTGTTTAA auzPf：5-CGGAATTC ATGTCTAAAGTCCTTGTATTAAAAT-3(EcoRI) auzPr：5-CCCAAGCTT TTAAACAGCCAACTTGTCGATACT-3(HindIII) The characteristics of azoreductase from Shewanella oneidensis MR-1 The characteristics of azoreductase from Shewanella oneidensis MR-1 * * * 能产生人胰岛素的大肠杆菌 基因“嫁接” ? 基因工程(gene engineering) 原 理： 操作水平： 结 果： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 ? 基因工程(gene engineering) 培育转基因大肠杆菌的简要过程： 你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些？ 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 提取 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 培育转基因大肠杆菌的关键步骤： 1.ONE 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 2.TWO 胰岛素基因与运载体DNA连接 3.THREE 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 如:EcoRI 1、该限制酶只能识别GAATTC的序列，说明了限制酶具有的特性是 。 2、 EcoRI限制酶识别了GAATTC的序列后，将会发生什么样的变化？ 积极思考 专一性 1.基因的剪刀—限制性核酸内切酶 基因操作(gene engineering)的工具 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2.分子针线—DNA连接酶 (DNA linking-enzyme) 积极思考 DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸(deoxyribonucleotide)分子的什么部位？ 基因操作(gene engineering)的工具 （1）作用对象：两个具有相同粘性末端的DNA片段。 （2）作用位置：脱氧核糖与磷酸之间的缺口（磷酸二酯键）