锌和维生素e对ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子smac表达的作用.docVIP

锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用 锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Sa表达的作用_论文_临床医学论文_医药学论文 【摘要】目的：探讨锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡因子Sa表达的作用及对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptzti… 【摘要】 目的：探讨锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡因子Sa表达的作用及对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptztin， STZ)，60g/kg一次注射，制备糖尿病大鼠模型。将40只实验组大鼠按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Sa的表达, HPIAS2000图像分析系统测定Sa在各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。 结果：对照组心肌细胞内Sa呈阴性表达, 糖尿病对照组心肌细胞内Sa呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Sa呈弱阳性表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内Sa呈阴性表达。图像分析结果显示：糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Sa的平均光密度及阳性面积率的差异有性意义(P 0.05);糖尿病补Zn+VE组与组之间Sa的平均光密度及阳性面积率的差异无性意义(P 0 05)。 结论： Zn和VE联合使用可减低糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的作用。 【关键词】 锌; 维生素E; 糖尿病; 心肌; Sa; 统计分析 糖尿病是常见的遗传倾向的葡萄糖代谢和内分泌障碍,是性或性胰岛素分泌引起的。近半个世纪来,糖尿病患病率和死亡率有上升趋势,在我国已继心血管疾病、肿瘤之后列第3位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病[1]。糖尿病在病理组织形态上主要是胰岛损伤,胰岛素或所引起。近年来,国内外许多学者临床和流行病学调查,周密设计的基础和实验,对糖尿病的病因较多的认识,但对原发性糖尿病的病因仍然不清楚[2～3]。 Sa是王晓东等2000年在线粒体中的蛋白,可释放到胞浆中凋亡的细胞凋亡和增殖的平衡是生物个体生长发育的基础,细胞增殖过度和(或)细胞凋亡受阻是肿瘤过程中的机制。Sa是近期的促凋亡蛋白,在凋亡信号刺激下与细胞色素(yt)一同从线粒体中释放,可并活化apaf1并解除凋亡抑制蛋白(IAPs)对aspase3、7、9的抑制作用而作用[4～6]。 Zn 机体必需的微量营养元素,是体内200多种蛋白酶的金属配基,其含量的势必有利于酶活性的。Zn 对细胞保护作用的途径,是基于控制过氧化作用。VE 天然抗氧化成分,对维持体内自由基平衡,机体发育,保护细胞膜稳定作用[7]。锌和维生素E是抗氧化剂并细胞保护作用。 本应用免疫组织化学方法观察了锌和维生素E联合应用对高血糖引起的心肌细胞凋亡的保护作用，旨在探讨两者对糖尿病大鼠心肌的保护作用。 1 材料与方法 1 材料 昆明种SD大鼠50只,雄性,体重180～200g ,武汉大学医学院实验动物中心,饲养1后实验。 1.2 方法 1.2.1 动物模型及分组 按体重随机分为对照组(10只)和实验组(40只) ,各组大鼠禁食12h 后,实验组大鼠以60g/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1l/ L、pH 4.4 的枸橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11g/l的STZ 溶液),对照组大鼠(N)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量等情况。一周后,采尾静脉血测血糖,以血糖浓度 16.6l/ L ,饮水量 40 l/ d ,尿糖强阳性( + + + ～ + + + + )的大鼠糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。各组动物均喂饲人工合成饲料,配方:酪蛋白20 % ,玉米淀粉65% ,植物油8% ,纤维素1% ,混合维生素1% ,混合无机盐5%。混合维生素和无机盐配方参见文献[5],合成饲料控制锌浓度为20g/kg。对照组和实验组去离子水;补Zn 组Zn 浓度为20 g/L的含ZnS4·7H2 去离子水;补VE 组每天以50 g/ kgVE 灌胃;Zn和VE联合补充组在Zn浓度为20g/L的含ZnS4 ·7H2 去离子水的以50g/ kgVE灌胃。实验期间,密切观察动物进食和饮水量,每周称两次体重,6周后将各组大鼠处死,切取心室壁肌组织,免疫组织化学实验观察。 1.2.2 主要试