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马铃薯试管苗壮苗培养基筛选 　　摘要 为了培育马铃薯健壮试管苗，提高其移栽成活率，该文用BY-14和ZH 2个马铃薯品种（系）的脱毒试管苗为材料，以MS培养基添加0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA为基本培养基，研究了不同蔗糖含量对马铃薯试管苗生长的影响。结果表明：0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA的浓度配比能使苗矮化、叶片浓绿，尤其能促进根粗壮和根数增多，有一定的壮苗作用。在有生长素存在的条件下，调整蔗糖的用量为20～40 g/L（用量差异与品种不同有关），其壮苗效果则更好，主要表现在促进根系发育和增加了茎叶干物质的含量，促进试管苗组织老化，进而提高其移栽抗逆性。 　　关键词 马铃薯；试管苗；壮苗；培养；糖分含量 　　中图分类号 S532 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）22-0065-02 　　在马铃薯品种资源试管种苗的保存过程中，存在种苗弱化和移栽到室外成活率低等现象，即随着继代次数的增加、继代时间的延长和外源生长延缓剂等在植物体内的累积，马铃薯试管苗发生严重退化。其表现为苗的生长势减弱、茎叶嫩黄、纤细瘦弱、繁殖系数减小等，不仅影响了试管苗的质量，也使试管苗在移栽到室外时成活率难以保证，从而影响了马铃薯脱毒种薯繁育的产量和质量。已有学者在马铃薯试管苗壮苗培养上做了大量的试验研究工作，如采用不同的措施促使马铃薯试管苗植株矮壮、茎杆变粗、叶片变浓绿、根系变发达等[1-4]。也有学者认为，在马铃薯试管苗的组织培养快繁中，蔗糖不仅是较为常用的碳源，而且它对调节培养基的渗透势也具有重要作用，与甘露醇和山梨醇等外部渗压剂的作用相似[5]。该试验以云南师范大学薯类作物研究所保存的BY-14和ZH 2个马铃薯品种（系）的脱毒试管苗为材料，以MS培养基添加0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA为基本培养基，研究了不同蔗糖含量对马铃薯试管苗生长的影响，以期从中能筛选出较适宜的试管苗壮苗培养基及培养方法，从而为提高马铃薯试管苗移栽成活率提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试材料为云南师范大学薯类作物研究所保存的BY-14和ZH 2个马铃薯品种（系）的脱毒试管苗。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 培养基的设计及培养。试??以MS培养基添加0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA为基本培养基，琼脂用量为6 g/L，pH值调至5.8左右，采用常规高温高压湿热灭菌方法。试验中培养基蔗糖浓度设5个水平，分别为20、30、40、50、60 g/L，另设不加激素的MS培养基（蔗糖浓度为30 g/L）为对照。各试验处理，分别用代号M1、M2、M3、M4、M5和MS表示。培养容器为500 mL罐头瓶，每个处理2次重复。每个处理接种10瓶，每瓶接种20株苗（带1片嫩叶的0.5～1.0 cm长的单节茎段）。培养室温度为21～23 ℃，光照2 000 lx，光照时间12 h/d。 　　1.2.2 观察记录。接种30 d后，从各个处理中随机抽取10瓶试管苗，每瓶中随机抽取8株试管苗测定其株高、茎粗、叶片数、根数、根长等生理指标，详细记录后，进行生物统计分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 激素对试管苗生长的影响 　　由表1可以看出，对于BY-14的试管苗来说，M2培养基培养的试管苗与MS培养基培养的试管苗的根生长情况有显著差异，尤其是M2培养基上的试管苗根长显著较短。对于ZH品种（系）的试管苗来说，M2培养基的试管苗在根数方面与MS处理的试管苗无明显差异，而根长却显著较短。虽然2个处理的根数相差不大，但M2培养基的试管苗的根长却明显较短，且通过观察可明显比较出M2培养基的试管苗的根比MS培???基试管苗的根要粗壮很多，而且表面根毛也较多，这更符合室外移栽对健壮苗的要求。由此表明，0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA的浓度配比确实有利于生根和使根粗壮。 　　由表2可以看出，M2培养基中的试管苗与MS培养基里的试管苗的茎粗无明显差异，而叶片数则有极显著的差异，但均值差异不大，为1～2片叶。ZH的试管苗在MS培养基和M2培养基中培养30 d后株高并没有明显差异；BY-14的试管苗在MS培养基和M2培养基中培养30 d后株高却有极显著差异，均值相差1.60 cm。由此表明，在MS培养基里添加0.2 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA对马铃薯脱毒试管苗地上部分即茎叶的影响不是很大，尤其是对株高和茎粗的影响较小，这种情况或许与品种不同和起始试管苗的状态不同有关。 　　此外，通过观测表明：不加激素的MS培养基中的试管苗生长很快，30 d就顶盖弯曲，根系细弱且长，基本没有表面根毛，茎杆嫩绿，叶片较大，但却较薄弱。