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甲醛对小鼠造血功能影响试验研究 　　摘要：为了探讨甲醛对小鼠造血功能的影响，将昆明小鼠30只随机分为5组，分别为低、中、高浓度甲醛组，盐酸苯肼试验组和空白对照组，试验期间连续腹腔用药，第二天起每天检测红细胞数量、白细胞数量、血红蛋白含量以及网织红细胞比例等参数的改变，试验第十天检测后处死小鼠取肝脏和骨髓常规石蜡切片HE染色。结果表明，用药第二天小鼠即出现溶血现象，第八天时，与空白对照组相比高浓度组小鼠红细胞数量降低了32.47%，血红蛋白含量降低了44.14%，网织红细胞比例高达22.86%；肝脏、骨髓切片可见较多破坏的红细胞。甲醛对小鼠有致溶血作用，能严重影响小鼠的造血功能。 　　关键词：小鼠；甲醛；盐酸苯肼；造血功能 　　中图分类号：TS201.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）16-3905-03 　　随着人们对居室环境的重视程度越来越高，家居装修也越来越受到重视???甲醛作为室内装饰材料中普遍存在的物质，家居装修材料中的甲醛含量超标会严重危害人们的身体健康[1-6]。本试验以昆明小鼠为试验对象，采用低、中、高浓度甲醛进行试验，研究了甲醛对小鼠造血功能的影响，以便为提高人们在日常生活中的防护能力和临床诊治相关的溶血性疾病提供一定的理论支持。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 试验动物 试验动物采用出生后8周龄的昆明小鼠30只，体重25 g左右，由潍坊学院实验动物中心提供，雌雄不限，正常喂食。 　　1.1.2 药品与试剂 　　主要药品：甲醛、盐酸苯肼，由上海国药集团化学试剂有限公司提供。 　　主要试剂：10 g/L煌焦油蓝乙醇溶液、HiCN转化液均按照常规方法配制；Hayem液、白细胞稀释液、0.1 mol/L盐酸、10 mg/mL甲醛、1 mg/mL盐酸苯肼生理盐水液现配现用；石蜡制片HE染色各种试剂均常规配制使用。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 药物注射 参考甲醛、盐酸苯肼的毒理作用确定用量[7]，腹腔注射，低、中、高浓度组10 mg/mL甲醛用量分别为1、2、3 mL/kg体重，盐酸苯肼每天注射5 mL/kg体重，首日加倍10 mL/kg，空白对照组注射生理盐水，0.1 mL/只。 　　1.2.2 检测方法 血常规检测采用常规方法[8，9]，处理后次日开始每组每天随机取1只断尾采血1次。 　　红细胞和白细胞采用改良Neubauer计数板计数，红细胞计数时采用Hayem稀释液，白细胞稀释液采用1%龙胆紫染色；血红蛋白含量的测定使用HiCN转化液，用TU-1800PC型紫外可见分光光度计测定吸光度；网织红细胞比例的测定用10 g/L煌焦油蓝乙醇溶液为染料，制成血涂片后在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位于油镜下计数1 000个红细胞中的网织红细胞并换算为百分比[10]。 　　石蜡制片染色方法：处死小鼠后取小块肝脏组织迅速固定于中性甲醛，常规脱水、浸蜡制片，HE染色后高倍镜观察；切断小鼠股骨两端使用注射器冲洗出骨髓，参照上法固定制片，HE染色观察。 　　2 结果与分析 　　结果显示，甲醛能促进红细胞溶解，小鼠表现典型的急性溶血性贫血症状，循环血中网织红细胞明显增多，骨髓片中红细胞碎片增多（图1），肝脏中央静脉见大小不等的红细胞，周围白细胞浸润明显（图2）。 　　镜下可见红细胞形态改变以及较多红细胞碎片。中央静脉内可见大小不等的成熟红细胞（粗↑），周围的炎性细胞（细↑）增多。 　　试验小鼠各项血液学指标也有较大变化，检测结果见表1。用药第二天小鼠即出现溶血现象，在第八天时，与空白对照组相比，高浓度组小鼠红细胞数量降低了32.47%。 　　血液中血红蛋白的含量在一定程度上反映了红细胞数量，表2中血红蛋白含量的变化与表1中红细胞数量变化趋势相同，在第八天时，与空白对照组相比，高浓度组小鼠血红蛋白含量降低了44.14%。总体上是随甲醛剂量的增加而减少。 　　由表3可知，使用盐酸苯肼或甲醛后白细胞的数量是明显增加了，这可能是由于甲醛、盐酸苯肼的毒理作用，注射后引发炎症，导致组织发生一系列炎性反应，表现为血液中的白细胞数目增多。 　　由表4可知，使用甲醛后随注射剂量的增加和时间的推移，网织红细胞的比例逐渐升高。在第八天时，高浓度组网织红细胞比例高达22.86%，这是因为循环血红细胞数量减少、血红蛋白含量降低时，机体的代偿性反应使骨髓中幼稚的红细胞提前进入血液循环，表现为血液中网织红细胞比例增加[11]。 　　3 小结与讨论 　　甲醛的用途非常广泛，塑料、橡胶、造纸、纺织、制药以及建筑材料和消毒、防腐过程中均要用到甲醛，各种人造板材中也含有甲醛，因此新装修的房间总会有甲醛释放，长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病、女性月经紊乱等，