at和ddimer检测的临床应用安庆课件.pptxVIP

AT和D-dimer检测的临床应用 单卫民 苏州大学附属第二医院 2011.05.14 血栓疾病的流行病学数据 世界人口死亡原因分析(WHO statistics) 血栓性疾病 感染 癌症 意外事故 肺部疾病 艾滋病 国内资料报道：在40岁以上的人群中心肌梗死的年发生率为39.7/100 000～64.0/100 000；脑卒中的年发生率为109.7/100 000，这证明血栓性疾病在中国属于常见病。 血栓疾病的流行病学数据 血栓性疾病中，静脉血栓占70％左右，动脉血栓占30％左右。 根据尸解资料显示，静脉血栓占40%～60%,但只有11%～15%被临床诊断。动脉血栓更易被忽视（vWF、血小板功能等检测缺乏）。 血栓栓塞性疾病 介入科 血管外科 呼吸科 ICU 普通外科 老年科 肿瘤科 骨科 内分泌 神经科 肾病科 儿科 妇产科 血栓 动脉及静脉 外科和内科 心脏科 神经外科 血液科 创伤外科 心胸外科 泌尿外科 XII 纤维蛋白原 纤维蛋白凝块 内源途径 XI IX VIII X V II 抗凝血酶 外源途径 组织因子 VII 蛋白 C 系统 凝固抑制 抗凝血酶（antithrombin，AT ）由肝脏、血管内 皮细胞、巨核细胞合成，是依赖肝素的丝氨酸蛋白酶 抑制剂，是人体内主要的血浆抗凝物质，尤其对凝血 酶的灭活能力占所有抗凝蛋白的70%～80%。 AT与丝氨酸蛋白酶作用的活性位点，位于Arg393- Ser394处，蛋白酶攻击该键使其裂解并引起AT变构， 从而形成AT与酶1：1复合物，这种共价结合是不可逆 的，肝素作用于AT的赖氨酸残基从而大大增强AT的抗 凝酶活性(2000倍以上)。 抗凝血酶(AT) 肝素和抗凝血酶的抑酶作用 Antithrombin Thrombin Heparin 抗凝血酶(AT)检测 抗凝血酶活性测定(发色底物法) 原理： 在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的AT形成1:1的复合物，剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显色基团，显色程度与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆AT:Ag呈负相关。 参考值： 108.5±5.3% AT:Ag含量测定(ELISA法) 原理： 将抗AT抗体包被在固相板，标本中的AT与固相的抗AT抗体相结合，再加入酶标记的抗AT抗体，形成抗体-抗原-酶标记抗体的复合物，加入显色剂后，根据显色的深浅来判断标本中AT的含量。 参考值： 290±30.2mg/L 抗凝血酶检测的临床意义 AT缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，但与动脉血栓形成关系不大。 一.遗传性AT缺乏： 遗传性AT缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，患病率约1/5000,发病多在19-25岁，患者常在手术、创伤、感染、妊娠或产后发生静脉血栓，并可在多出反复发生血栓。此病可分为两型：1.交叉反应物(cross reaction material)阴性型(CRM⁻），即抗原与活性均下降；2. (CRM ⁺ ）型，即抗原正常，活性下降（结构异常）。 共同表现是对肝素的亲和力降低，从而对凝血酶的灭活能力明显减弱。 二.获得性AT缺乏： 1.合成降低，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝 癌晚期等。 2.丢失增加，见于肾病综合征。 3.消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如 心脑血管疾病、DIC、外科手术后、深静脉 血栓形成、肺梗死、妊高症等。 三.AT水平增高： 在血友病、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，AT水平增高。 D-二聚体的产生 纤 维 蛋 白 原 的 构 造 由纤维蛋白原生成的纤维蛋白单体 Thrombin Fibrinogen 由纤维蛋白单体生成的稳定型纤维蛋白 稳定型纤维蛋白 纤维蛋白（fibrin） Plasmin FDP (源于纤维蛋白) 纤维蛋白的分解 Ｄ二聚体 交联纤维蛋白降解混合物 D-D是混合物中的最小片段 FgDP (源于纤维蛋白原) 纤维蛋白原 Plasmin Plasmin Plasmin 纤维蛋白原的分解 现有D-dimer 检测存在的问题 手工乳胶凝集法 半定量 试剂用量大 (多次稀释步骤) 成本高 灵敏度不足和不精确度高 ELISA D-dimer 实验 定量 精密度、敏感度、特异性高 试剂用量少 实验步骤耗时，不适合作“一线”诊断实验使用 D二聚体标准——中国国家标准(讨论稿） 4.2 阴性预测值 结合临床诊断的验前概率进行D-二聚体检测，其阴性预测值应不低于95%。 4.